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upwardkl

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:电泳出来的条带很奇怪,求解!! 已有2人参与

求助:在我的电泳图中,为检测我的目的基因在不同组织模板中的表达情况,,,不同的模板应为唯一的变量,,,但条带形状不一,,不知可能是那些原因导致的呢??

模板本身已经过GAPDH检测,显示正常
??
反应体系
PCR过程
胶的浓度
电泳缓冲液,电泳的电压
电泳的染色液等???
什么原因的可能性最大哦??

请求帮助和指导!
谢谢!

求助:电泳出来的条带很奇怪,求解!!
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求助:电泳出来的条带很奇怪,求解!!-1
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雪霁花开,向上追求
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petty04

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:29:57
你的marker条带似乎也不够尖锐,看看你的跑胶buffer是否浓度太高了
2楼2017-09-02 12:56:39
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by petty04 at 2017-09-02 12:56:39
你的marker条带似乎也不够尖锐,看看你的跑胶buffer是否浓度太高了

嗯嗯,是10ul的加样体系,加了1ul的buffer(含Mg离子)????
雪霁花开,向上追求
3楼2017-09-02 14:51:21
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yangmeng0711

新虫 (小有名气)

4楼2017-09-02 14:57:45
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-09-02 14:57:45
TAE是否有问题?

我该肿么判断TAE是否有问题呢?
雪霁花开,向上追求
5楼2017-09-02 15:52:20
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能量车gogogo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:30:11
可能电压不稳定。
要是电压太低,造成跑胶的时间过长,缓冲液的温度升高,样品条带就可能这样了,明显是样品已经弥散了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

人不会永远十七岁,但永远有人十七岁
6楼2017-09-02 16:27:32
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yangmeng0711

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by upwardkl at 2017-09-02 15:52:20
我该肿么判断TAE是否有问题呢?...

从新配,比例别搞错了

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-09-02 18:03:16
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 能量车gogogo at 2017-09-02 16:27:32
可能电压不稳定。
要是电压太低,造成跑胶的时间过长,缓冲液的温度升高,样品条带就可能这样了,明显是样品已经弥散了。

您好!我想再问下,那适合的电压一般是多少?,,时间一般是多久为好??
雪霁花开,向上追求
8楼2017-09-02 19:04:15
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-09-02 18:03:16
从新配,比例别搞错了
...

我想再请问一下,您说的比例,是指胶的,还是PCR反应体系的哦?或是其他的哦?
雪霁花开,向上追求
9楼2017-09-02 19:05:57
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-09-02 14:57:45
TAE是否有问题?

应该没有问题的,
雪霁花开,向上追求
10楼2017-09-02 19:06:25
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