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薰衣草夏枯草

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物生理实验 已有2人参与

测pod酶除了愈创木酚法还有其他方法吗,为什么我测时溶液颜色没有变化,光度值也没变?

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薰衣草夏枯草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 氚核 at 2017-09-01 18:45:52
活性太低可以试试提高加样量,如果还是不行,就考虑是提取步骤出问题了。我们之前都是pH7.8缓冲液加0.186gEDTA定容到1升,内含1%PVP,4℃,12000g离心20min,可供您参考
...

好的,谢了

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7楼2017-09-02 19:34:41
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查看全部 7 个回答

氚核

木虫 (正式写手)

可能的情况 1.酶样品活性低 2.愈创木酚没有完全溶解3.过氧化氢因氧化造成有效浓度降低。话说这个方法很灵敏的,如果没有颜色,就是体系出问题了

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2楼2017-08-31 12:14:43
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安妮十一月

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我图书馆借了好几本书都是这个方法的,自己试着做了一次,我做的植物叶片,用的o.5M PH7.8的磷酸缓冲液研磨提取的酶液,然后就按照实验书上的步骤,反应液用的 50mlPH6.0的PB+28ul愈创木酚+19ul30%H2O2混合的,每次用3ml,最后显色很明显啊,茶褐色,就是测了5min了OD值它还在变大,而且感觉斜率还一样,没有发现最大斜率的那一段呢,还得在做
3楼2017-08-31 17:55:32
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薰衣草夏枯草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 氚核 at 2017-08-31 12:14:43
可能的情况 1.酶样品活性低 2.愈创木酚没有完全溶解3.过氧化氢因氧化造成有效浓度降低。话说这个方法很灵敏的,如果没有颜色,就是体系出问题了

哦,谢了,还有,如果是酶样活性太低该怎么办,测不了了吗?

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4楼2017-09-01 17:09:43
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