24小时热门版块排行榜    

查看: 2101  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

2017mwl

新虫 (小有名气)

[交流] 表达载体pgex6p1 已有2人参与

目的片段和表达载体pgex6p1酶连过夜18h 菌落和菌液pcr都没有目的条带 请问表达载体有选择性么?是不是得用文献中所述载体?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2017mwl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xmcw765 at 2017-08-27 20:27:03
我用过pgex6p1,应该是没问题的,你可以载体单酶切鉴定一下,还有你目的片段pcr有没有问题,如果都没问题,就改变连接比例,尝试一下

载体单酶切后是一条线性的条带么

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-08-27 20:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:35:05
蛋白表达情况应该是有选择性的,但载体与目的片段连接应该没有,检查酶切位点,片段浓度,比例,连接体系,连接酶是否正常。

发自小木虫Android客户端
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
2楼2017-08-27 19:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2017mwl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yudaoqian88 at 2017-08-27 19:59:25
蛋白表达情况应该是有选择性的,但载体与目的片段连接应该没有,检查酶切位点,片段浓度,比例,连接体系,连接酶是否正常。

嗯嗯 质粒是半年前提的质粒 也有可能质粒本身不纯了 我就怕表达载体不适合 因为在文献里没看到用过这个载体 就用实验室现成的这个了

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-08-27 20:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmcw765

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:35:45
我用过pgex6p1,应该是没问题的,你可以载体单酶切鉴定一下,还有你目的片段pcr有没有问题,如果都没问题,就改变连接比例,尝试一下

发自小木虫Android客户端
4楼2017-08-27 20:27:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见