24小时热门版块排行榜    

查看: 2208  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

2017mwl

新虫 (小有名气)

[交流] 表达载体pgex6p1 已有2人参与

目的片段和表达载体pgex6p1酶连过夜18h 菌落和菌液pcr都没有目的条带 请问表达载体有选择性么?是不是得用文献中所述载体?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2017mwl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yudaoqian88 at 2017-08-27 19:59:25
蛋白表达情况应该是有选择性的,但载体与目的片段连接应该没有,检查酶切位点,片段浓度,比例,连接体系,连接酶是否正常。

嗯嗯 质粒是半年前提的质粒 也有可能质粒本身不纯了 我就怕表达载体不适合 因为在文献里没看到用过这个载体 就用实验室现成的这个了

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-08-27 20:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:35:05
蛋白表达情况应该是有选择性的,但载体与目的片段连接应该没有,检查酶切位点,片段浓度,比例,连接体系,连接酶是否正常。

发自小木虫Android客户端
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
2楼2017-08-27 19:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmcw765

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:35:45
我用过pgex6p1,应该是没问题的,你可以载体单酶切鉴定一下,还有你目的片段pcr有没有问题,如果都没问题,就改变连接比例,尝试一下

发自小木虫Android客户端
4楼2017-08-27 20:27:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2017mwl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xmcw765 at 2017-08-27 20:27:03
我用过pgex6p1,应该是没问题的,你可以载体单酶切鉴定一下,还有你目的片段pcr有没有问题,如果都没问题,就改变连接比例,尝试一下

载体单酶切后是一条线性的条带么

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-08-27 20:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 17:09 by winsaint
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见