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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 如何构建标签蛋白
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一点也不简单

新虫 (知名作家)

[求助] 如何构建标签蛋白 已有1人参与

想要构建几个蛋白，分别带走flag和HA标签的蛋白。不知道该怎么设计，求助大神

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1楼 2017-08-26 16:59:21
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一点也不简单

新虫 (知名作家)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by nadia926499 at 2017-08-26 17:31:07
可以直接引物p上去

那标签蛋白的序列需要和我的目的蛋白同一个物种的吗？我做的是黄曲霉，没有搜到有flag序列

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3楼2017-08-26 18:23:24
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nadia926499

木虫 (小有名气)
可以直接引物p上去

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一点也不简单
2楼2017-08-26 17:31:07
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nadia926499

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一点也不简单 at 2017-08-26 18:23:24
那标签蛋白的序列需要和我的目的蛋白同一个物种的吗？我做的是黄曲霉，没有搜到有flag序列
...

要做flag和HA标签的话，就直接加这编码这两个蛋白的序列上去就好了，你可能要考虑下黄曲霉菌的密码子偏好性吧，应该是可以表达的

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4楼2017-08-27 00:12:51
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阳光zh

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

加标签的话可以直接使用PCR扩增的方法加在目的基因上，
或者也可以直接选择带有标签的载体，直接插入目的基因，

FLAG和HA的标签序列都是固定的，跟物种没有关系。
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5楼2017-08-30 17:07:09
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