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噬酸菌的基因敲除
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| 我现在将构建好的携带氯霉素抗性基因的敲除载体PNZ5319-luxS电转化导入噬酸菌后，在含氯霉素抗性的MRS平板中有菌落长出，就进行了提全基因组后PCR验证，p上游同源臂和下游同源臂。我的问题是 1.现在状态的菌长的很慢，长3，4天也不会很浓，所以提出的全基因组条带也不是很亮 2.进行PCR，P出了在上下游位置的条带，但是都不亮，所以无法送去测序，而且pcr结果都很不稳定，很多时候P不出来。但是因为之前有P到，感觉这个基因是已经敲掉的，所以我不想放弃，因为之前电转化也做了好几个月，才有菌长出来的。我做这个实验还是小白，所以请各位帮帮忙分析一下，不胜感激！ |
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