| 查看: 1422 | 回复: 6 | ||
[求助]
关于重叠pcr 有一些问题 已有2人参与
|
|
重叠pcr的引物方面，第一个基因的下游引物和第二个基因的上游引物，不都包含另一个片段的一小部分，那么如果我要融合的这两个基因片段是在同一个基因组上，那么如何保证，他们各自的特异结合呢，是靠长度吗。如果靠长度的话，那么同一个片段的上下游引物，退火温度差太多，该怎么选择呢？？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不应该看fileCode
已经有6人回复
-
2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B?
已经有7人回复
-
好奇怪的filecode
已经有6人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有21人回复
-
长年满屏的广告，版主太不责任了。基金也等的急
已经有4人回复
-
filecode
已经有15人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有4人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有35人回复
-
职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊
已经有4人回复
-
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有10人回复
snoopytbw
荣誉版主 (著名写手)
- MicEPI: 6
- 应助: 261 (大学生)
- 贵宾: 0.014
- 金币: 5985.4
- 散金: 3
- 红花: 71
- 帖子: 1633
- 在线: 265小时
- 虫号: 3361216
- 注册: 2014-08-11
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
2楼2017-08-24 08:52:06
snoopytbw
荣誉版主 (著名写手)
- MicEPI: 6
- 应助: 261 (大学生)
- 贵宾: 0.014
- 金币: 5985.4
- 散金: 3
- 红花: 71
- 帖子: 1633
- 在线: 265小时
- 虫号: 3361216
- 注册: 2014-08-11
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
3楼2017-08-24 08:53:52
送红花一朵 |
您好，您一般做，退火温度都是平均Tm值家2℃？ 就比如一个是60，一个是66。您的退火温度是63？ 另外，我用的是primerStar这种酶。 发自小木虫Android客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4楼2017-08-24 13:05:07
送红花一朵 |
不对，写错了。上面那个例子，您的退火温度是65？ 另外，在请问一下，这个体系的问题。我用这个PrimerStar的酶，50ul体系分别扩增出来两个目的片段，胶回收产物之后，先不加引物，把这两个片段混合扩增8-10个循环，这时候，加入的片段含量和其他原料含量应该是多少，用多少的体系。 再接下来的拼接体系，就直接加入两个引物片段就可以？？ 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-08-24 13:50:37
6楼2017-08-25 10:07:13
7楼2018-03-12 09:34:51
