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迪妮莎的泪

新虫 (小有名气)

[求助] 关于氯霉素在接合转移中的作用 已有1人参与

最近在看三亲本接合的文献,想不明白,氯霉素不是能够抑制细菌生长吗,为什么在受体菌,辅助菌,供体菌三者混合之前,要单独添加氯霉素?这样做的意义是什么,不怕把受体菌杀死了吗?忘大神赐教

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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子

引用回帖:
6楼: Originally posted by 迪妮莎的泪 at 2017-08-21 13:19:05
好的谢谢,但还有不明白的地方,接合转移一般都是要把转坐子转到受体菌的质粒上吗?我看的这篇文献为了找到这株菌降解目标污染物的功能基因,就让转坐子mini_Tn5随机插入这株菌的基因得到突变株库,再用TAIL PCR扩 ...

我之前做的结合转移目的只是为了将外源的质粒转入受体菌。外源质粒可以在受体菌种复制的话,有两种情况,一是在受体菌中稳定复制传代,另外就是与受体菌本身的的染色体DNA发生整合或者同源双交换。后边在LB培养基中添加抗生素培养受体菌,也是为了使转入受体菌中的质粒能够稳定复制传代。我是这么理解的,有不对的话请批评指正。
麻辣王子不爱做实验
7楼2017-08-21 14:13:14
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迪妮莎的泪

新虫 (小有名气)

没有人吗,在网上查询这个怎么都没有查到答案。。

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2楼2017-08-20 23:19:49
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y383514131

银虫 (小有名气)

氯霉素好像可以抑制菌体生长,从而达到质粒高拷贝的目的,质粒上面应该有这个抗性

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此事说来终觉浅,莫问出处便是真
3楼2017-08-20 23:43:40
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迪妮莎的泪

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by y383514131 at 2017-08-20 23:43:40
氯霉素好像可以抑制菌体生长,从而达到质粒高拷贝的目的,质粒上面应该有这个抗性

文献中写的是"把菌接入0.5*LB培养基,同时添加40mg/L的氯霉素,于30度摇床中以180rpm培养至对数期",目的不是为了抑制菌生长吧

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4楼2017-08-21 00:50:12
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