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[求助]
总是p不出来目标带 已有2人参与
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新手求助:我要扩增全长1902bp的CDS片段,上游引物是CATGGCGGCCGCCGTGCAGC 下游引物:GAGCTCATGGCGCCGGCGCC 体系:ddH2O:2ul cDNA:2ul buffer:5ul dNTPs:5ul Mg2+:3ul 引物各1ul KOD PLUS NEO:1ul 两步法:预变性:94℃2min 变性:98℃10s 延伸:68℃1min 再延伸72℃5min 用的是2000的maker 之前跑三步法没跑出啦,两步法也不行,我的退火温度算出来72℃。新手被折磨死了! 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2017-08-11 15:40:31
4楼2017-08-11 16:58:18
ladejueshi
金虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 1224.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 沙发: 2
- 帖子: 436
- 在线: 228.6小时
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10楼2017-08-12 10:19:10

11楼2017-08-14 21:56:39
12楼2017-08-14 22:21:16
漫漫123
金虫 (小有名气)
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- 专业: 代数学
13楼2017-08-15 14:07:42
16楼2017-08-15 21:35:05
3楼2017-08-11 16:55:31

5楼2017-08-11 16:59:31
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我打算试试的,因为我这个退火温度太高,一开始用三步法没p出来,然后用的是两步法,但是还是一直p不出来,换了模板后两步法也p不出来,然后打算换三步法再试试。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2017-08-11 17:04:31
7楼2017-08-11 17:06:35
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我是打算拿到引物后设置一下温度梯度,换个酶试试的,不知道有没有推荐,我的目的片段设计引物的GC含量80%,扩增的是CDS片段,所以我的引物怎么改,gc含量都很高。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2017-08-11 17:08:57
9楼2017-08-12 10:05:41














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