| 查看: 823 | 回复: 4 | ||
[求助]
科学小白，刚入师门，最近在质粒抽提方面遇到了极大的困扰，请大家排忧解难。 已有2人参与
|
|
我最近在做大肠杆菌的转化涂板，可是成效不佳。涂板实验已经做了三次了，第一次长菌了，但是菌落pcr没结果，失败了重来。第二次涂板没有长菌，三种基因四个板子均没有长菌迹象，开始分析认为是没有连接上，后来电泳检测载体，发现载体浓度很低，这可能会成为影响实验的一部分。另外，考虑到是不是引物设计错了，师兄又帮我检测了一下，引物设计是对的。但是没有找到失败的原因。第三次，将初始pcr基因再pcr，获得浓度更高的回收产物，载体用的是二师兄给的酶切成功的载体，进行链接转化后，摇菌离心后发现菌体颜色非黄白色，而是浅黑色，当时怀疑菌落里面是否污染了杂菌（五个管子同时都是这样），我追问师兄，他也未能给出确切答复，只是让我继续涂板看结果再判断。今早来的时候发现还是没有长菌。我用的两种载体，认真选择了氨苄和卡娜的培养基，并且涂板的时候也高度认真，但是仍然不知道错在了哪里。所以希望大家可以伸出援手，授人以渔。谢谢！ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有94人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有4人回复
2楼2017-08-11 11:26:33
3楼2017-08-11 13:26:45
4楼2017-08-11 14:19:32
5楼2017-08-11 16:40:02
