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多糖单糖组分分析 已有3人参与
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有谁知道有哪家检测机构会用GCMS 检测单糖组分的 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2017-08-06 14:55:38
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3楼2017-08-06 22:31:01
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【答案】应助回帖
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方法一：还原水解法（适合糖分子含有3，6-内醚结构的多糖） 取样品约1mg，置15*150mm试管中，加200μl 3mol/L 三氟乙酸溶液和50μl 4-甲基吗啉硼烷（还原剂）溶液，80℃油浴水解5min（试管约1cm在油浴中即可），取出，加入50μl 4-甲基吗啉硼烷溶液，120℃油浴水解1h，取出，再加入100μl 4-甲基吗啉硼烷溶液，转入25ml梨形烧瓶，60℃水浴减压蒸干，再加2~3ml乙腈蒸干三次，然后加200μl三氟乙酸和200μl乙酸酐，50℃水浴乙酰化10min，加3ml水终止反应，室温放置30min，用5ml氯仿萃取全乙酰化衍生物，氯仿层用水洗三次，无水硫酸钠干燥，GC-MS检测。 方法二： 取1mg样品，置10ml安瓿中，加1ml 2 mol/L TFA溶液，封口，120℃烘箱中水解反应1.5~2 h，取出，放冷至室温后，将水解液转入25ml梨形烧瓶，60℃水浴减压蒸干，加200μl水溶解，然后加1ml 0.5mol/L NaBH4的DMSO溶液，混匀，于40℃水浴还原反应90min。再逐滴加入100μl 冰醋酸，混匀，然后加入200μl 1-甲基咪唑和1ml乙酸酐，混匀，于40℃水浴乙酰化反应10min。反应结束即加入2ml蒸馏水，混匀，再加入2ml氯仿，充分混匀萃取乙酰化产物，小心吸出并弃去大部分上层水液，下层溶液加2ml水洗涤一次，吸取下层溶液，用1g无水硫酸钠干燥，GC-MS检测。 方法三： 取1mg样品，置10ml安瓿中，加2ml 2 mol/L TFA溶液，封口，120℃烘箱中水解反应2 h，取出，放冷至室温后，将水解液转入25ml梨形烧瓶，60℃水浴减压蒸干，再加1~2ml甲醇蒸干3次，加50mg NaBH4和2ml水，混匀，室温还原水解4h以上，逐滴加入冰醋酸破坏过量的NaBH4，至溶液pH 4~5，60℃水浴减压蒸至粘稠状，加甲醇：冰醋酸(5:1)溶液1~2ml蒸干几次，最终蒸干至粉末状，置105℃烘箱中烘干10min，然后加入2~3ml乙酸酐，105℃乙酰化1h，取出， 1） 加1~2ml甲苯，50℃水浴减压蒸干（须加甲苯多次），加5ml水溶解，然后用氯仿萃取，氯仿层水洗，无水硫酸钠干燥，置样品瓶中备用，GC分析检测。 或 2） 趁热加入1ml水，摇匀，室温放置30min，间或震摇，50℃水浴减压蒸干，加5ml水溶解，然后用氯仿萃取，氯仿层水洗，无水硫酸钠干燥，置样品瓶中备用，GC分析检测。 |
4楼2017-08-06 23:51:32
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5楼2017-08-07 13:35:58
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