| 查看: 5030 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
摇菌6小时左右就目测浑浊了，是怎么回事？
|
||
|
构建质粒，经过酶切连接，再转化到大肠杆菌E.Coli。在有抗性的平板上挑取生长出来的单菌落，放到带有同样抗性的液体LB摇菌。37度，220转每分钟，大约6小时，就目测液体比较浑浊了。这是怎么了？（后来，我把未接种任何细菌的LB液体培养基置于同样的条件摇了约18小时，未见浑浊。） 用试剂盒提取质粒送去测序，得到的峰很杂乱，不能读出信息。在测序前，先用PCR根据构建了的质粒进行粗筛，得到了目的条带，但是部分质粒样品出现了非特异条带（目的条带约600bp，非特异条带约4000bp）。 估计质粒样品很不纯。请问我该怎样补救（得到一个意见：把提取的质粒样品再转化一次到大肠杆菌，同时提高筛选平板的抗生素浓度）？还是希望不再做一回酶切连接了。请各位大侠不吝赐教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有281人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
4楼2017-08-05 15:58:16
2楼2017-08-04 21:14:22
|
有杂带表明连接可能出问题，目的片段不纯，测序杂峰表明菌有问题，，如果连接产物没问题，可以划线，如果不能确定连接产物，最好重做，免得日后麻烦。。。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-08-05 09:37:25
钱塘幼麟5楼2017-08-05 16:00:16
30