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各位大神，小伙伴们有做蛋白酶表达的看过来 已有2人参与
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本人做的蛋白酶表达，系以pet28a为载体，BL21(DE3)为宿主的蛋白酶胞内表达，当加入IPTG诱导4h后发现培养基中有黄色絮状物，在这里本人认为出现了致死，而且对照组(BL21-pet28a)却长势非常好，细胞均匀。重点是在提取总蛋白后，在进行SDS_PAGE蛋白电泳分析时发现实验组的很多蛋白都已经降解，条带少，无法做出一个漂亮的图来显示我的蛋白酶表达，希望有过蛋白酶表达经验的小伙伴，大神们帮我指点一二！ 发自小木虫Android客户端 |
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该菌是我师兄筛选出来，由我做克隆表达，师兄的文献中显示该酶被EDTA完全抑制，而且我在提取总蛋白过程中，已经加了EDTA为什么还是会降解？求大神支招！ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-08-03 11:28:04
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再顶一下 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-08-04 08:27:20
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼2017-08-05 16:42:23
5楼2017-08-05 20:43:16
6楼2017-08-07 07:34:34
7楼2017-08-07 07:36:37