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各位大神,小伙伴们有做蛋白酶表达的看过来 已有2人参与
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本人做的蛋白酶表达,系以pet28a为载体,BL21(DE3)为宿主的蛋白酶胞内表达,当加入IPTG诱导4h后发现培养基中有黄色絮状物,在这里本人认为出现了致死,而且对照组(BL21-pet28a)却长势非常好,细胞均匀。重点是在提取总蛋白后,在进行SDS_PAGE蛋白电泳分析时发现实验组的很多蛋白都已经降解,条带少,无法做出一个漂亮的图来显示我的蛋白酶表达,希望有过蛋白酶表达经验的小伙伴,大神们帮我指点一二! 发自小木虫Android客户端 |
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该菌是我师兄筛选出来,由我做克隆表达,师兄的文献中显示该酶被EDTA完全抑制,而且我在提取总蛋白过程中,已经加了EDTA为什么还是会降解?求大神支招! 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-08-03 11:28:04
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再顶一下 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-08-04 08:27:20
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼2017-08-05 16:42:23
5楼2017-08-05 20:43:16
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