应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE问题 条带模糊
71/1返回列表
查看: 983  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jghgimi4

金虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE问题 条带模糊

这是我跑出来的胶，marker跑歪了不说，怎么只出来了两三条，并且还很模糊。我配的是5%的浓缩胶，10%的分离胶，按理说还应该再跑出两条。
倒数第二条带是烟草全蛋白的，怎么也只有那么几条，还很弱，跑电泳的操作我感觉已经可以了，不知道为什么还会出现这种问题？
别的试剂大部分都是新买的，就剩下acr、bis，这两个会不会过期？
其他条带也是从植物中提的全蛋白，我试过几种方法，效果都不太好，现在我不知道怎么办了，哪位高手能指点一下，小弟不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-02-04 16:55:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coffee424907

木虫 (著名写手)

瞎说几句

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 21:28
1、有人建议两边的泳道不上样，这两个道容易出问题

2、丙烯酰胺溶液说是最好1月配1次，还有配完过滤了吗？

3、上样量够大不？

4、染色、脱色阶段有没有问题？
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-02-04 17:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 21:28
1如果试剂没问题，一定要保证下层胶完全凝固，凝固之后上面滴一些异丙醇，压力作用下使下层胶面平整.
2上层胶插梳子的时候，一定要保证梳子下面没气泡，而且梳子下面也水平，再有就是拔梳子的时候，凹槽里边容易有好多残余胶，小心的扣出来。
3胶板放入缓冲液的时候注意下面是否有气泡，否则会影响条带整齐。
4上样的时候，不要扎破凹槽，两边的条带容易变形正常，压力一般向中间堆积，尤其是上样量少的时候。
赞一下(10人) 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
3楼2009-02-04 18:18:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

有缘千里

银虫 (小有名气)
你提纯的样品里面是不是带着什么提取剂之类的东西。一般样品脱盐脱不干净就这个样子。
赞一下 回复此楼
4楼2009-02-04 20:23:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hu6704526

银虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论，欢迎常来~ 2-8 15:55
一般情况下注意两个问题：
  一：样品的制备，SDS-PAGE胶是变性条件下电泳，样品沉淀后直接用上样缓冲液溶解后上样就可以了。
  二：凝胶配制后要有充分的凝固时间，我认为要大于两个小时才可以，尤其是分离胶。
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2009-02-08 15:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shadowfly

木虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 2-9 16:14
1、acr/bis重新配，其他的最好也重新配，特别是aps
2、降低电压、电流
3、样品脱盐
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2009-02-09 01:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwang007

木虫 (正式写手)
染色前最好髟醋酸固定过夜，另外就是将分离胶浓度加大到12.5%，效果可能会更好
赞一下 回复此楼
7楼2009-02-09 09:12:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jghgimi4 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭