应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE问题 条带模糊
71/1返回列表
查看: 865  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jghgimi4

金虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE问题 条带模糊

这是我跑出来的胶，marker跑歪了不说，怎么只出来了两三条，并且还很模糊。我配的是5%的浓缩胶，10%的分离胶，按理说还应该再跑出两条。
倒数第二条带是烟草全蛋白的，怎么也只有那么几条，还很弱，跑电泳的操作我感觉已经可以了，不知道为什么还会出现这种问题？
别的试剂大部分都是新买的，就剩下acr、bis，这两个会不会过期？
其他条带也是从植物中提的全蛋白，我试过几种方法，效果都不太好，现在我不知道怎么办了，哪位高手能指点一下，小弟不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-02-04 16:55:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coffee424907

木虫 (著名写手)

瞎说几句

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 21:28
1、有人建议两边的泳道不上样，这两个道容易出问题

2、丙烯酰胺溶液说是最好1月配1次，还有配完过滤了吗？

3、上样量够大不？

4、染色、脱色阶段有没有问题？
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-02-04 17:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 21:28
1如果试剂没问题，一定要保证下层胶完全凝固，凝固之后上面滴一些异丙醇，压力作用下使下层胶面平整.
2上层胶插梳子的时候，一定要保证梳子下面没气泡，而且梳子下面也水平，再有就是拔梳子的时候，凹槽里边容易有好多残余胶，小心的扣出来。
3胶板放入缓冲液的时候注意下面是否有气泡，否则会影响条带整齐。
4上样的时候，不要扎破凹槽，两边的条带容易变形正常，压力一般向中间堆积，尤其是上样量少的时候。
赞一下(10人) 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
3楼2009-02-04 18:18:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

有缘千里

银虫 (小有名气)
你提纯的样品里面是不是带着什么提取剂之类的东西。一般样品脱盐脱不干净就这个样子。
赞一下 回复此楼
4楼2009-02-04 20:23:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hu6704526

银虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论，欢迎常来~ 2-8 15:55
一般情况下注意两个问题：
  一：样品的制备，SDS-PAGE胶是变性条件下电泳，样品沉淀后直接用上样缓冲液溶解后上样就可以了。
  二：凝胶配制后要有充分的凝固时间，我认为要大于两个小时才可以，尤其是分离胶。
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2009-02-08 15:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shadowfly

木虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 2-9 16:14
1、acr/bis重新配，其他的最好也重新配，特别是aps
2、降低电压、电流
3、样品脱盐
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2009-02-09 01:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwang007

木虫 (正式写手)
染色前最好髟醋酸固定过夜，另外就是将分离胶浓度加大到12.5%，效果可能会更好
赞一下 回复此楼
7楼2009-02-09 09:12:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jghgimi4 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +7 junqihahaha 2026-03-26 7/350 2026-03-26 16:51 by allen-yin
[考研] 机械学硕310分，数一英一，一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。，。，。，。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 303求调剂 +6 元夕元 2026-03-20 7/350 2026-03-25 12:00 by edmund7
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-24 4/200 2026-03-24 14:44 by sprinining
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭