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jghgimi4

金虫 (小有名气)

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[交流] SDS-PAGE问题条带模糊

这是我跑出来的胶，marker跑歪了不说，怎么只出来了两三条，并且还很模糊。我配的是5%的浓缩胶，10%的分离胶，按理说还应该再跑出两条。
倒数第二条带是烟草全蛋白的，怎么也只有那么几条，还很弱，跑电泳的操作我感觉已经可以了，不知道为什么还会出现这种问题？
别的试剂大部分都是新买的，就剩下acr、bis，这两个会不会过期？
其他条带也是从植物中提的全蛋白，我试过几种方法，效果都不太好，现在我不知道怎么办了，哪位高手能指点一下，小弟不胜感激！

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1楼 2009-02-04 16:55:49

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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

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★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 21:28

1如果试剂没问题，一定要保证下层胶完全凝固，凝固之后上面滴一些异丙醇，压力作用下使下层胶面平整.
2上层胶插梳子的时候，一定要保证梳子下面没气泡，而且梳子下面也水平，再有就是拔梳子的时候，凹槽里边容易有好多残余胶，小心的扣出来。
3胶板放入缓冲液的时候注意下面是否有气泡，否则会影响条带整齐。
4上样的时候，不要扎破凹槽，两边的条带容易变形正常，压力一般向中间堆积，尤其是上样量少的时候。