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木虫 (正式写手)

wublab

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[求助] 关于感受态细胞制备的疑问已有3人参与

一直以来做的感受态细胞转化率都不是很高，现在想问几个问题。我们一直都是用takara的感受态细胞的kit制作的。
在加入solution a和solution b的时候都有一个除尽液体，目的是为了使转化率提高，为什么，我们一般用移液枪吸出来但是不是特别干净，之前用的是滤纸，还有有什么好的方法吗？
还有就是有两个步骤需要离心，然后沉淀要让它悬浮起来接触溶液，试剂盒上面说的是用手指轻轻弹，不能剧烈震荡，这个剧烈的程度是什么，我手指甲都给弹痛了，还是没有浮起来。后面他们都是用枪抽吸混匀的，这样对吗？

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你好

1楼 2017-07-21 15:12:58

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木虫 (正式写手)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by dellxiong at 2017-07-24 11:14:52
一点心得：
1、菌OD在0.6左右（过夜培养的活化菌按1%接入后培养90min，开始测OD,最好不要超过 0.8）。
2、离心前将菌液放冰上30-60min。
3、4度，2500g离心。
4、可以将0.1M CaCl2换为80mM CaCl2与20mM MgCl2( ...

好的感谢

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