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纯化的PCR产物测序无信号、双峰或者特殊结构
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gaohuihui
铁杆木虫
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虫号: 877479
[交流]
纯化的PCR产物测序无信号、双峰或者特殊结构
扩增一个片段(电泳检测是单一条带),胶回收纯化后送公司测序(回收后电泳检测条带较亮)。测序结果经常是PCR无信号,双峰或者特殊结构。提供的样品浓度够了啊,纯度的话,扩增出的单一条带胶回收试剂盒回收,应该不会有问题的。哪位大虾给个建议,怎么改善条件才能使得测序结果较好呢?
我这边能保证的就是PCR扩增时单一条带,回收产物条带较亮。但是回收产物是用胶回收试剂盒回收,纯度(A260/A280)没办法测。
有没有做测序的朋友,帮忙看看啊
[
Last edited by gaohuihui on 2017-7-21 at 14:51
]
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2017-07-21 13:23:45
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gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
或者浓度低、或者纯度低
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98楼
2017-07-22 05:25:37
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mlxmiao
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gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
回收后的浓度太低,虽然亮
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3楼
2017-07-21 13:41:50
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★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
很好
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7楼
2017-07-21 13:56:18
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gaohuihui
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3楼
:
Originally posted by
mlxmiao
at 2017-07-21 13:41:50
回收后的浓度太低,虽然亮
浓度多少才算不低呢? 另外,条带亮不就是浓度高么?
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11楼
2017-07-21 14:21:49
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mjlsb
6楼
2017-07-21 13:51
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gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
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wdxmu
14楼
2017-07-21 14:34
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gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
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