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strugglejsp

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质溶于KOH溶液的机理和产物,外行不懂,求助专业人士给予帮助 已有3人参与

如题,我是一个外行人,因为要研究蛋白质的物化性质,但是买来的蛋白质都是不溶于水的,偶尔看到有人说蛋白质可以溶于碱溶液,我就尝试了一下,结果真的可以溶解,但是现在我想知道蛋白质溶于KOH溶液的机理是什么,生成的产物又有什么特性,跪求专业人士解答,谢谢!
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情毒之殇

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-07-20 07:45:26
(1)大多数蛋白质为酸性蛋白,等电点为酸性,远离等电点可以增加溶解度,所以一般酸性蛋白弱碱buffer纯化和溶解。
(2)强酸或者强碱都可能咋成蛋白质的水解。

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我们的心是荒野还是沃土?!
2楼2017-07-19 17:10:13
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strugglejsp

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 情毒之殇 at 2017-07-19 17:10:13
(1)大多数蛋白质为酸性蛋白,等电点为酸性,远离等电点可以增加溶解度,所以一般酸性蛋白弱碱buffer纯化和溶解。
(2)强酸或者强碱都可能咋成蛋白质的水解。

比如说牛奶蛋白的等电点大概在4.2,就属于酸性蛋白,当我把它加入到KOH溶液中搅拌后就变成澄清的溶液了,那么反应的机理是什么呢?溶液中还是以蛋白质的分子存在呢?还是以分解出来的氨基酸存在呢?谢谢
3楼2017-07-19 20:29:23
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-22 08:49:39
1、因为蛋白质的基本组成单位是氨基酸,氨基酸里含有羧基,羧基呈酸性,所以羧基可以与氢氧化钾反应生成羧酸盐,是水溶性的,所以可以溶于氢氧化钾。

2、 氢氧化钾蛋白质溶解度可以反映蛋白质变性的情况。不同的蛋白 质品种,氢氧化钾蛋白质溶解度不同。蛋白质变性越大,氢氧化钾蛋 白质溶解度越小。 用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质,在催 化剂作用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。

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及时行乐,人生不留遗憾!
4楼2017-07-19 21:22:48
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strugglejsp

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-19 21:22:48
1、因为蛋白质的基本组成单位是氨基酸,氨基酸里含有羧基,羧基呈酸性,所以羧基可以与氢氧化钾反应生成羧酸盐,是水溶性的,所以可以溶于氢氧化钾。

2、 氢氧化钾蛋白质溶解度可以反映蛋白质变性的情况。不同的 ...

非常感谢,请问有没有相关的参考文献呢?
5楼2017-07-20 08:55:37
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情毒之殇

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by strugglejsp at 2017-07-19 20:29:23
比如说牛奶蛋白的等电点大概在4.2,就属于酸性蛋白,当我把它加入到KOH溶液中搅拌后就变成澄清的溶液了,那么反应的机理是什么呢?溶液中还是以蛋白质的分子存在呢?还是以分解出来的氨基酸存在呢?谢谢...

这个具体没有操作过,确实不太清楚其成分是如何变化的,不好意思哈
我们的心是荒野还是沃土?!
6楼2017-07-21 08:55:20
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闲来小译

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-22 08:49:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by strugglejsp at 2017-07-19 20:29:23
比如说牛奶蛋白的等电点大概在4.2,就属于酸性蛋白,当我把它加入到KOH溶液中搅拌后就变成澄清的溶液了,那么反应的机理是什么呢?溶液中还是以蛋白质的分子存在呢?还是以分解出来的氨基酸存在呢?谢谢...

蛋白质的高级构象(二级,三级和四级结构)是有很多非共价键作用力维持的,包括氢键,离子键,疏水作用,和范德华力等等。基于基团极性形成的氢键,离子键和范德华力可以被其他强极性的分子竞争并打破。强酸强碱是典型的强极性分子,可以直接摧毁这些高级构像并使蛋白溶解。其实大多数蛋白(除了膜蛋白)都是可溶的,只是溶解度不高,因为其表面的极性或疏水域容易在高浓度下发生结合而产生聚集。在强酸强碱下这种聚集不可能实现的。

蛋白质的一级结构由公价的肽键构成,一般情况下是十分稳定的,强酸强碱条件下也不会断裂。所以不大可能会有氨基酸分解出来的。

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7楼2017-07-22 02:12:34
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strugglejsp

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 闲来小译 at 2017-07-22 02:12:34
蛋白质的高级构象(二级,三级和四级结构)是有很多非共价键作用力维持的,包括氢键,离子键,疏水作用,和范德华力等等。基于基团极性形成的氢键,离子键和范德华力可以被其他强极性的分子竞争并打破。强酸强碱是 ...

非常感谢你,谢谢 我再去查询资料
8楼2017-07-22 08:48:27
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