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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

[求助] 请教大家一个关于calcein AM/PI染色活/死细胞的实验 已有5人参与

请教大家一个关于calcein AM/PI染色活/死细胞的实验
先是细胞爬片,在将纳米材料与细胞作用后加入按说明稀释好的calcein AM/PI试剂盒,孵育30min后洗涤,多聚甲醛固定,封片,照共聚焦。现在的问题是,照共聚焦的时候用488nm激发,能同时在相同的细胞上看到红色和绿色荧光,这跟文献报道的同一张图上红色是死细胞 绿色是活细胞不太一样,请问是为什么呢?
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得勝的生命

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
luo_jiaojiao: 金币+5 2017-07-20 02:24:04
这个染剂的激发光范围有一些重叠,用共聚焦显微镜看到的确实是这样的。没毛病。
3楼2017-07-18 12:40:44
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许为中-4759

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
live/dead,加染料避光30min就好,不需要后面的固定封片,固定就把细胞杀死了,后面选择合适的通道观察拍摄就好了
2楼2017-07-18 09:34:17
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090420042

金虫 (著名写手)

死活染色,无需后面的固定。
固定导致细胞死亡,由于洗涤不完全,出现了残余染色剂把原来的活细胞重新染色的情况。
没事瞎溜达
4楼2017-07-18 15:33:32
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纳米所细胞

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问对支架上的细胞进行live/dead染色,细胞数量和染色液剂量应该怎么控制
5楼2017-07-19 11:33:14
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