24小时热门版块排行榜    

查看: 1280  |  回复: 14

文竹子

新虫 (初入文坛)


已领完
ssDNA的纯化
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫,下载小木虫客户端

反转录产生的cDNA,经消化去除RNA后,怎样将其中的ssDNA纯化出来?各位虫友们有没有好的建议或意见?谢谢啦!

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木木的头

木虫 (知名作家)


7楼2017-07-17 21:38:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

文竹子

新虫 (初入文坛)


比较着急,如果有懂得的虫友,请不吝赐教!

发自小木虫Android客户端
9楼2017-07-17 21:44:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果没有DNA polymerase activity的话不直接就是单链吗,为什么需要纯化?
10楼2017-07-18 01:07:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

文竹子

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
10楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-18 01:07:41
如果没有DNA polymerase activity的话不直接就是单链吗,为什么需要纯化?

因为一下步有其他用途,需要更换buffer

发自小木虫Android客户端
11楼2017-07-18 09:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-19 07:44:59
引用回帖:
11楼: Originally posted by 文竹子 at 2017-07-18 09:04:05
因为一下步有其他用途,需要更换buffer
...

可以直接做dialysis,另外即便是双链,做变性后立刻放在冰上不是也行?
12楼2017-07-18 10:17:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

文竹子

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
12楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-18 10:17:04
可以直接做dialysis,另外即便是双链,做变性后立刻放在冰上不是也行?...

谢谢你的建议。但好像都没有很好的满足我的实验要求。透析的效率应该不高,而且我的片段长度只有600nt,并且样本量很少。另外你说的双链DNA的变性的方法,也不太行。这样没法将两条链分开。

发自小木虫Android客户端
13楼2017-07-18 10:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)


引用回帖:
13楼: Originally posted by 文竹子 at 2017-07-18 10:44:21
谢谢你的建议。但好像都没有很好的满足我的实验要求。透析的效率应该不高,而且我的片段长度只有600nt,并且样本量很少。另外你说的双链DNA的变性的方法,也不太行。这样没法将两条链分开。
...

两条链不一样?
14楼2017-07-19 00:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

petty04

新虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种情况应该可以跑7%-8%的变性PAGE胶来分离纯化你的600nt左右的单链DNA。

你还可以在胶上放上单链的ssDNA ladder,染色后判断逆转录是否成功。我知道有一家做单链ladder挺好的,应该是cnbioruler。cn  你可以去看看。
15楼2017-08-04 16:11:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
2017-07-17 21:38   回复  
文竹子(金币+4): 谢谢参与
已获得4个金币 发自小木虫IOS客户端
txwznb3楼
2017-07-17 21:38   回复  
文竹子(金币+5): 谢谢参与
已获得5个金币 发自小木虫Android客户端
2017-07-17 21:38   回复  
文竹子(金币+4): 谢谢参与
已获得4个金币 发自小木虫Android客户端
cffyau5楼
2017-07-17 21:38   回复  
文竹子(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
2017-07-17 21:38   回复  
文竹子(金币+4): 谢谢参与
已获得4个金币 发自小木虫Android客户端
2017-07-17 21:39   回复  
文竹子(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 文竹子 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见