应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 限制性内切酶稀释
101/1返回列表
查看: 503  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

微笑漩涡

新虫 (著名写手)

[交流] 限制性内切酶稀释

限制性内切酶稀释时用10×buffer稀释后储存于－20度，在多长时间内使用活性不至于下降太多啊？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-01-29 09:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
为什么要稀释呢？
赞一下 回复此楼
漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
2楼2009-01-29 10:18:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑漩涡

新虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 香菱儿 at 2009-1-29 10:18:
为什么要稀释呢？

我要部分酶切DNA，而这个酶是识别4碱基的，理论上256bp就有一个酶切位点，所以如果酶浓度大的化，几分钟就把DNA切得太小了。所以要稀释，但是不知道稀释后的酶在多长时间内使用有效。

比如我在20ul的体系中就用0.1U，但是酶储液是10U/ul，不稀释的话，用枪根本没法吸啊。

[ Last edited by 微笑漩涡 on 2009-1-29 at 10:31 ]
赞一下 回复此楼
3楼2009-01-29 10:27:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-31 14:15
不稀释，控制时间不是也可以吗
酶切是酶在时间上累积的结果
赞一下(6人) 回复此楼
4楼2009-01-30 23:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
补足甘油(否则会结冰的),应该问题不大
赞一下 回复此楼
5楼2009-01-31 19:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
……0.1U
兄弟你也太节省了……
我一般都用1U的
赞一下 回复此楼
6楼2009-01-31 22:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑漩涡

新虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-1-31 22:31:
……0.1U
兄弟你也太节省了……
我一般都用1U的

我也不想省啊，但是没有办法啊。

20ul的酶切体系中，DNA3ul（量为1ug）。这样的话酶就不能多加了，要是加1U

的话，一分钟就全没有了。提高体系中DNA的量不知道可行不。比如提高到2－

3ug。相应的酶也就多加一些了。

你在作四碱基识别酶切的时候也是用1U么？体系及其中的DNA能给我些建议么
赞一下 回复此楼
7楼2009-02-01 01:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
==b
反正切开不就行了，管他多少分钟……
20ul体系确实是用1U酶切1ug DNA/小时啊~
不就是酶活的定义？
赞一下 回复此楼
8楼2009-02-01 09:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑漩涡

新虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-2-1 09:21:
==b
反正切开不就行了，管他多少分钟……
20ul体系确实是用1U酶切1ug DNA/小时啊~
不就是酶活的定义？

但是我要的是部分酶切，要目的片段集中在4－10KB。呵呵，我试试看吧。这样

的话得精确到分才行。
赞一下 回复此楼
9楼2009-02-01 14:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
那就不要用20ul体系切了
200ul体系切不就相当于稀释了酶了？
赞一下 回复此楼
10楼2009-02-01 18:42:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 微笑漩涡 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 0856材料求调剂 +12 hyf hyf hyf 2026-02-28 13/650 2026-03-02 20:19 by hypershenger
[考研] 0856求调剂285 +11 吕仔龙 2026-02-28 11/550 2026-03-02 20:15 by hypershenger
[考研] 化学，材料，环境类求调剂 +7 考研版棒棒 2026-03-02 7/350 2026-03-02 19:56 by hypershenger
[考研] 302材料工程求调剂 +5 Doleres 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:53 by 张晓芳0105
[考研] 0854总分272 +3 打小就是老实人 2026-03-02 4/200 2026-03-02 19:49 by 求调剂zz
[考研] 求调剂 +10 yunziaaaaa 2026-03-01 11/550 2026-03-02 19:17 by caszguilin
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[考研] 299求调剂 +4 kkcoco25 2026-03-02 4/200 2026-03-02 18:04 by barlinike
[考研] 一志愿华中科技大学，化学专业344分，求调剂 +3 邢xing1 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:32 by houyaoxu
[考研] 一志愿东北大学材料专硕328，求调剂 +3 shs1083 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:27 by houyaoxu
[考研] 0703 总分319求调剂 +3 Xinyuu 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:20 by houyaoxu
[考研] 一志愿华南理工大学材料与化工326分，求调剂 +3 wujinrui1 2026-02-28 3/150 2026-03-02 16:36 by chuocheng
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +4 Qwertyuop 2026-03-01 4/200 2026-03-02 14:27 by 升格阿达
[考研] 材料与化工328求调剂 +3 。，。，。，。i 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:09 by houyaoxu
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 材料类求调剂 +11 wana_kiko 2026-02-28 14/700 2026-03-02 08:46 by 聪明的大松鼠
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭