24小时热门版块排行榜    

查看: 2969  |  回复: 11

bq28

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因GC含量高,引物能否设在起始密码子前50bp?做原核表达用 已有5人参与

基因的CDS区GC含量达70%,如果从起始密码子处设计引物会包含一段连续的GC,能否在ATG前50bp处设计引物扩增片段克隆到原核表达载体上,表达HIs蛋白用。
望大神指导

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

fengshen2005

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以分两步,第一步将UTR+CDS一起扩增,然后以此为模板、以CDS

发自小木虫Android客户端
3楼2017-07-14 06:30:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengshen2005

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
以CDS两端引物再扩增

发自小木虫Android客户端
4楼2017-07-14 06:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by bq28 at 2017-07-14 07:32:34
是用KOD plus扩增的,之前扩不出来 还加了GC buffer
...

加了betaine 和 DMSO没?
7楼2017-07-14 07:43:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)

可以用KOD扩
2楼2017-07-14 06:03:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bq28

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-14 06:03:20
可以用KOD扩

是用KOD plus扩增的,之前扩不出来 还加了GC buffer

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-07-14 07:32:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bq28

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fengshen2005 at 2017-07-14 06:30:39
可以分两步,第一步将UTR+CDS一起扩增,然后以此为模板、以CDS

好的,试一下

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-07-14 07:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerry110

新虫 (小有名气)

体系加DMSO
8楼2017-07-14 09:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bq28

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-14 07:43:01
加了betaine 和 DMSO没?...

betaine未加,GC buffer 中有DMSO吧,所以未另外添加。
请问加betaine的作用是什么呢?

发自小木虫IOS客户端
9楼2017-07-14 13:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小银河

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
新手上路,来学习下

发自小木虫IOS客户端
10楼2017-07-14 21:17:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bq28 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见