24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3541)
>虫友互识 (1036)
>文献求助 (269)
>导师招生 (179)
>休闲灌水 (166)
>考博 (135)
>教师之家 (90)
>硕博家园 (84)
>博后之家 (82)
>论文投稿 (81)
>找工作 (77)
>基金申请 (71)
>论文道贺祈福 (67)
>考研 (60)
>公派出国 (51)
>招聘信息布告栏 (38)

返回列表

jianshuilan

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 495.1
散金: 10
帖子: 30
在线: 25.3小时
虫号: 2378707
注册: 2013-03-26
性别: MM
专业: 生物物理、生物化学与分子

[求助] DNA溶液测序已有2人参与

求助：
提取的粪便DNA溶液，原液1ul，20ul rTaq反应体系，没有条带。DNA溶液稀释至少10倍PCR后有条带。DNA浓度50-200ng/ul不等，260/280在1.4左右，这样的DNA溶液可以拿去测序吗？

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2017-07-12 09:16:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

MolEPI: 6
应助: 626 (博士)
贵宾: 0.096
金币: 27590.2
散金: 1052
红花: 288
沙发: 2
帖子: 5663
在线: 726.4小时
虫号: 1183978
注册: 2011-01-05
性别: GG
专业: 生物信息学
管辖: 农林

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

1、DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断，符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6~1.8之间，低于此范围表明蛋白质含量超标，高于此范围表明样品中含有RNA。

2、纯DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9，表明有RNA污染；＜1.6，表明有蛋白质、酚等污染）。

3、蛋白质污染：确保不要吸入中间层及有机相。减少起始样品量，确保裂解完全、彻底。加入氯仿后首先要充分混匀，并且离心分层的离心力和时间要足够。如果所得RNA的OD260/OD280比值偏低，则用氯仿重新抽提一次，再沉淀，溶解。

4、个人建议，纯度较高的时候送，比较可靠。