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玄玄子铁杆木虫 (正式写手)
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CO-IP后WB条带发光液发光后，膜变黄色 已有1人参与
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这张是CO-IP后做WB发光后的膜，图片从左到右，前两个箭头分别是原液和孵育后上清目的条带的位置，第三个箭头所指是洗脱液上样，发现此条带与目的条带相比要偏小，怀疑为抗体轻链，但比25kd位置要大（图中25kd位置为maker带最下一条）。我的问题主要是：1,、发光后为什么膜会变黄？这样造成了 之后的曝光不出黑色条带，黄色部分曝光结果为“空洞‘’2、因为通过曝光前两条带的比较，发现原液与孵育后上清中目的蛋白相比，上清中含量要低不少，说明目的蛋白被沉淀下来了，那为什么洗脱液曝不出目的条带？目的条带位置以下的黄色部分又是什么？它为什么会变黄且曝出空洞的结果？求大神们帮帮忙分析分析！ VF~Y$%K3SO]UR_]`SDTE{2Q.png |
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多谢了！诚然你说的很有道理，但是我认为这不是根本原因。确实出现黄色和空洞现象是氧化太过和淬灭造成，但是我的二抗浓度已经是1:8000/10000了，这是绝对不高的浓度了，我曝光的时间全在5秒以下...总之，我想说明的是这是我co-ip之后样品的问题。我想请问一下，CO-IP最后洗脱样品你是采用的什么方法？ 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-08-09 00:52:14
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本帖内容被屏蔽 |
5楼2018-09-06 15:34:21