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6M的盐酸胍使蛋白质变性是指盐酸胍在溶液中的终浓度吗 发自小木虫Android客户端 |
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盐酸胍是变性剂,它破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。 盐酸胍在溶液中的终浓度为6M,但需要注意调节pH。同时应根据实际情况选择合适的buffer体系,比如pH8.0。 可以选择pKa在8.0附近的缓冲体系,如20~100mM Tris(pKa=8.06), 一般用HCl调pH到8.0即可。常常会加入一定浓度的NaCl, 以增强缓冲能力,这时,严格的讲,可以用HCl/NaOH调pH。 用phosphate(pKa2=7.2)也可以,但在8.0下缓冲能力不如Tris-HCl,这是因为7.2距离8.0较远。最简单的配法是称取一定量的NaH2PO4,然后用NaOH调pH到8.0。 |
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