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蕉下客鹿鹿

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白变性 已有1人参与

6M的盐酸胍使蛋白质变性是指盐酸胍在溶液中的终浓度吗

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蕉下客鹿鹿

新虫 (小有名气)

谢谢你的解答,还有一个问题,1mg/ml或10mg/ml时,都是终浓度为6M?还是蛋白质与盐酸胍之间存在计量关系?

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3楼2017-07-07 15:53:22
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
盐酸胍是变性剂,它破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。

盐酸胍在溶液中的终浓度为6M,但需要注意调节pH。同时应根据实际情况选择合适的buffer体系,比如pH8.0。

可以选择pKa在8.0附近的缓冲体系,如20~100mM Tris(pKa=8.06), 一般用HCl调pH到8.0即可。常常会加入一定浓度的NaCl, 以增强缓冲能力,这时,严格的讲,可以用HCl/NaOH调pH。

用phosphate(pKa2=7.2)也可以,但在8.0下缓冲能力不如Tris-HCl,这是因为7.2距离8.0较远。最简单的配法是称取一定量的NaH2PO4,然后用NaOH调pH到8.0。

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及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-05 20:01:48
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蕉下客鹿鹿

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-05 20:01:48
盐酸胍是变性剂,它破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。

盐酸胍在溶液中的终浓度为6M,但需要注意调节pH。同时应根据实际情况选择合适的buffer体系,比如pH8.0。

可以选择pKa在8.0附近的缓冲体系,如20~100mM ...

谢谢你的解答,还有一个问题,1mg/ml或10mg/ml时,都是终浓度为6M?还是蛋白质与盐酸胍之间存在计量关系?

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4楼2017-07-07 15:53:55
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