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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 用ET12567做过接合转化实验的进
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dgm1208

银虫 (小有名气)

[求助] 用ET12567做过接合转化实验的进 已有1人参与

诸位好，最近我在做链霉菌和大肠杆菌的接合转化实验，用的大肠杆菌是ET12567（pUZ8002）, 我把自己的构建好的质粒转到ET12567之后，提了一下质粒，发现只有一条条带，看大小应该是我转进去的那个质粒；
问题：1.做过的虫友，在实验的过程中pUZ8002能一起提取出来吗？
2.pUZ8002质粒的大小是多少？是否有图谱？
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科研路艰辛···
1楼 2017-07-05 13:55:27
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dgm1208

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shuhua759 at 2017-07-06 07:59:49
pUZ8002质粒好像很大，拷贝数很低。如果你转化的是cosmid质粒的话，一般是看见一条很大的条带，如果转化的质粒比较小的化，可以看见两条带，我们转ET菌株，一般不抽质粒验证，只做PCR验证。

首先非常感谢应助，我转进去的是一个15Kb的质粒，不知道您说的这个puz8002很大是个什么概念？我是做了后面的接合转化失败了之后才回过头来提质粒的，失败的可能有很多，我想首先排除ET12567是不是本身有问题。

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科研路艰辛···
6楼2017-07-06 08:23:01
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dgm1208

银虫 (小有名气)
就这么沉了？

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科研路艰辛···
2楼2017-07-06 00:16:03
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qaswzxd123

新虫 (初入文坛)
帮顶，虽然不清楚

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3楼2017-07-06 01:09:40
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shuhua759

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
dgm1208: 金币+140, ★★★★★最佳答案 2017-07-06 21:16:06
pUZ8002质粒好像很大，拷贝数很低。如果你转化的是cosmid质粒的话，一般是看见一条很大的条带，如果转化的质粒比较小的化，可以看见两条带，我们转ET菌株，一般不抽质粒验证，只做PCR验证。
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4楼2017-07-06 07:59:49
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