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用ET12567做过接合转化实验的进已有1人参与
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诸位好，最近我在做链霉菌和大肠杆菌的接合转化实验，用的大肠杆菌是ET12567（pUZ8002）, 我把自己的构建好的质粒转到ET12567之后，提了一下质粒，发现只有一条条带，看大小应该是我转进去的那个质粒； 问题：1.做过的虫友，在实验的过程中pUZ8002能一起提取出来吗？ 2.pUZ8002质粒的大小是多少？是否有图谱？  |
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2楼2017-07-06 00:16:03
qaswzxd123
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3楼2017-07-06 01:09:40
shuhua759
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4楼2017-07-06 07:59:49
5楼2017-07-06 08:15:40
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首先非常感谢应助，我转进去的是一个15Kb的质粒，不知道您说的这个puz8002很大是个什么概念？我是做了后面的接合转化失败了之后才回过头来提质粒的，失败的可能有很多，我想首先排除ET12567是不是本身有问题。 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2017-07-06 08:23:01
shuhua759
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23kb以上，如果是你的质粒是15k的话，你本身的质粒条带应该很清楚，而8002的条带看不到也是正常，接合转移不成功的原因很多，你的这个菌做结合转移有没有成功的先例？另外Et菌珠是不是正确？ 发自小木虫Android客户端 |
7楼2017-07-06 13:55:31
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感谢回复...我这个菌之前用ET成功转进去过一个带GFP的质粒（毕业好多年的师姐做的 都联系不上了），ET这个菌我拿过来扩了一个16S 结果是对的...不过我要转的这个质粒自己有转移的元件 会不会和8002冲突？ 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2017-07-06 14:03:36
shuhua759
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9楼2017-07-06 15:51:56
匿名
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10楼2017-07-06 16:51:36