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dgm1208

银虫 (小有名气)

[求助] 用ET12567做过接合转化实验的进已有1人参与

诸位好,最近我在做链霉菌和大肠杆菌的接合转化实验,用的大肠杆菌是ET12567(pUZ8002), 我把自己的构建好的质粒转到ET12567之后,提了一下质粒,发现只有一条条带,看大小应该是我转进去的那个质粒;
问题:1.做过的虫友,在实验的过程中pUZ8002能一起提取出来吗?
2.pUZ8002质粒的大小是多少?是否有图谱?
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科研路艰辛···
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dgm1208

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by shuhua759 at 2017-07-06 15:51:56
ET是一直保存在负80度吗?ET菌珠如果退化也有可能结合做不出来,ET菌珠有个特点,过夜培养混浊以后,静置半个到一个小时,会看到菌体会沉淀下来

是的 一直-80 下午提了一波质粒 换了一个可以提低拷贝的试剂盒 好像有个很大的质粒 您看下(如图 下面是点样孔 marker1.5k的 )靠近点样孔的那个很模糊的是不是就是puz8002?
用ET12567做过接合转化实验的进



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科研路艰辛···
11楼2017-07-06 17:52:26
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dgm1208

银虫 (小有名气)

科研路艰辛···
2楼2017-07-06 00:16:03
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qaswzxd123

新虫 (初入文坛)

帮顶,虽然不清楚

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-07-06 01:09:40
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shuhua759

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
dgm1208: 金币+140, ★★★★★最佳答案 2017-07-06 21:16:06
pUZ8002质粒好像很大,拷贝数很低。如果你转化的是cosmid质粒的话,一般是看见一条很大的条带,如果转化的质粒比较小的化,可以看见两条带,我们转ET菌株,一般不抽质粒验证,只做PCR验证。
4楼2017-07-06 07:59:49
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