| 查看: 3250 | 回复: 8 | |||
落日余晖34木虫 (正式写手)
|
[交流]
crispr ptarget-grna质粒构建 已有3人参与
|
|
在构建这个pTarget-grna时，我看文献上说采用含grna的引物反pTargetF质粒后会产生一个缺口，修复这个缺口需要转入DH5α中，修复完成的的ptargetF-grna，构建完成是直接跑胶与ptargetF进行对比，可是就算是构建完成，也就多了20bp的样子，这个跑胶应该是分辨不出来的吧？还是说应该送去测序看一下？另外反p的时候引物应该用保真性高的聚合酶吧？ 注:采用的系统是双质粒系统，在大肠中进行敲除。 有比较了解的小伙伴吗？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有284人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
donkey2017
新虫 (正式写手)
- 应助: 233 (大学生)
- 金币: 8514.4
- 红花: 25
- 帖子: 602
- 在线: 193.8小时
- 虫号: 6861606
- 注册: 2017-06-28
- 专业: 生物化学
2楼2017-07-02 10:05:40
落日余晖34
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 4009.2
- 散金: 563
- 帖子: 584
- 在线: 98小时
- 虫号: 3019522
- 注册: 2014-03-05
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2017-07-03 20:45:04
4楼2018-10-30 11:02:11
落日余晖34
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 4009.2
- 散金: 563
- 帖子: 584
- 在线: 98小时
- 虫号: 3019522
- 注册: 2014-03-05
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2018-11-01 09:33:24
6楼2018-11-01 11:30:40
落日余晖34
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 4009.2
- 散金: 563
- 帖子: 584
- 在线: 98小时
- 虫号: 3019522
- 注册: 2014-03-05
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
7楼2018-11-02 07:33:17
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我没有加酶切位点，是想通过两条引物上加的互补序列搭在一起成环的。那你的引物具体是酶切位点-与目标序列互补的N20-gRNA这样的设计吗？ 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2018-11-02 15:17:18
9楼2019-05-08 16:03:48