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好不靠谱

新虫 (初入文坛)

[交流] 链霉菌PCR 已有5人参与

我有三个链霉菌的基因片段需要从基因组中克隆出来,可是GC含量很高,设计了引物,但是觉得引物很难弄,用梯度PCR以及touchdown都做了很多次,改过温度,酶,但是还是很难P出目的条带

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mayunhui

新虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
直接从基因组中克隆基因吗?应该不太可能吧。
书到用时方恨少
3楼2017-06-30 09:26:41
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jinhx87

至尊木虫 (知名作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-30 22:58:18
2个关键点:1、DNA聚合酶;2、能否变性。是哪个地方的?
2楼2017-06-30 08:53:13
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dahai1984

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-30 22:58:35
需要设计特异引物,整个体系是否正确,降低对火温度试试看

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4楼2017-06-30 09:52:21
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好不靠谱

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jinhx87 at 2017-06-30 08:53:13
2个关键点:1、DNA聚合酶;2、能否变性。是哪个地方的?

你好,第二点我不太明白

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5楼2017-06-30 10:37:31
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