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大摇大摆

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于敲除Ura3基因时,5-FOA培养基配制的问题

如题,最近在做酿酒酵母中Ura3基因的敲除,其中5-FOA的培养基我是这么配的:因为其溶解性不好,但是它可以溶于DMSO中,所以我是在DMSO中溶解之后再用无菌有机滤器过滤除菌再加到YPD的培养基中。配了两次,开始是100mg5-FOA融到1mlDMSO中,再加到100ml的YPD中,后来转化了敲除质粒的菌株没有筛出来,就用了200mg的5-FOA。这次我把原始的菌株也涂到了加了5-FOA的YPD板子上,它还能生长,原则上不是正常菌株会致死吗?想请各位前辈给分析一下,哪里出了问题,不胜感激。
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seeeea

新虫 (小有名气)

你好 请问你的5-FOA加入培养基后有调ph吗?我现在在做解脂亚洛酵母的URA3敲除,也遇到了5-FOA上长出的转化子,在-u板上也能正常生长的情况
2楼2018-01-10 16:08:43
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