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linker加6*his的测序问题，有人遇见过吗？ 已有1人参与
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| 大家好！因考虑在研究的蛋白上连上6*his，就在his前加上了GGGGS作为linker，设计的大致结构为目的蛋白-linker-6*his，然后真核表达。linker-6*his合成的碱基序列为GGTGGTGGTGGTAGC（或TCA）CACCACCACCACCATCAC，试验中出现了奇怪的现象：pcr扩增后连克隆载体pEASY,测序到上面linker-6*his时就无法通过，上游引物到这个地方测不通，下游引物直接测序失败，是因为gc含量高吗？但看上面顶多百分之七十；还是因为形成了二级结构？现在有些担心到时候会不会不能表达，希望得到大家的帮助，谢谢！ |
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