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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助！！！！液相氯化铵缓冲液使用注意事项
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助！！！！液相氯化铵缓冲液使用注意事项 已有2人参与

我采用500mL水溶解3.0g氯化铵，加三氟醋酸调pH至2.5-3.0做样，洗脱梯度在有机相50-95，柱效下降很快，为什么？是氯化铵体系使用的时候有什么限制吗？柱子是普通的C18反相柱
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我不知道我想要什么，所以我一直在摸索
1楼 2017-06-23 12:02:58
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
爱嘉101: 金币+3, ★有帮助 2017-06-24 14:08:31
会不会是三氟乙酸浓度太高了，三氟乙酸一般浓度不要太高，损伤柱子，还有用完缓冲盐要及时冲柱子，不然在柱子上残留会造成堵塞啥的，对柱子损伤很大
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2楼2017-06-23 13:17:21
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
如果你是用乙腈作有机相，95%太高了，氯化铵会沉淀。冲洗柱子时不要用纯水，保留5-10%的有机相。氯化铵本身在pH2-3没有缓冲能力，最多算是调节离子强度。可以试试醋酸铵。

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9楼2017-06-24 13:36:30
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱嘉101 at 2017-06-23 15:20:18
不清楚呀，以前做过纯三氟醋酸调节pH到这个范围的，但是柱子正常的。做完之后没有用水冲，因为还要继续作样，一般是晚上下班的时候用水换下体系，清洗保存，时长不超过1.5h一般，是不是水洗不够？...

恩 一般洗柱子是低流速高水相多冲一会，然后再梯度回到高有机相相保存柱子
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4楼2017-06-23 17:20:36
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
盐浓度太高了吧，大神
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5楼2017-06-24 08:09:56
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普通回帖

爱嘉101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by llw1986 at 2017-06-23 13:17:21
会不会是三氟乙酸浓度太高了，三氟乙酸一般浓度不要太高，损伤柱子，还有用完缓冲盐要及时冲柱子，不然在柱子上残留会造成堵塞啥的，对柱子损伤很大

不清楚呀，以前做过纯三氟醋酸调节pH到这个范围的，但是柱子正常的。做完之后没有用水冲，因为还要继续作样，一般是晚上下班的时候用水换下体系，清洗保存，时长不超过1.5h一般，是不是水洗不够？
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我不知道我想要什么，所以我一直在摸索
3楼2017-06-23 15:20:18
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by t892893235 at 2017-06-24 08:09:56
盐浓度太高了吧，大神

但事实是我的浓度比网上找的氯化铵缓冲液配置的浓度已经小了一半了
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我不知道我想要什么，所以我一直在摸索
6楼2017-06-24 09:49:27
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by llw1986 at 2017-06-23 17:20:36
恩 一般洗柱子是低流速高水相多冲一会，然后再梯度回到高有机相相保存柱子...

昨天这么试了，柱效基本没有回复多少，峰形稍稍改善。大神，那你知道氯化铵一般使用浓度和氯化铵：有机相的浓度范围吗
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我不知道我想要什么，所以我一直在摸索
7楼2017-06-24 09:50:31
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9号77

木虫 (文坛精英)
pH是不是太酸。
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已取得初会，执业药师，备考CPA，一起呀？
8楼2017-06-24 11:58:19
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 9号77 at 2017-06-24 11:58:19
pH是不是太酸。

pH3左右，还在柱子正常范围呢
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10楼2017-06-24 14:02:10
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