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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助！！！！液相氯化铵缓冲液使用注意事项
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助！！！！液相氯化铵缓冲液使用注意事项 已有2人参与

我采用500mL水溶解3.0g氯化铵，加三氟醋酸调pH至2.5-3.0做样，洗脱梯度在有机相50-95，柱效下降很快，为什么？是氯化铵体系使用的时候有什么限制吗？柱子是普通的C18反相柱
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我不知道我想要什么，所以我一直在摸索
1楼 2017-06-23 12:02:58
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
如果你是用乙腈作有机相，95%太高了，氯化铵会沉淀。冲洗柱子时不要用纯水，保留5-10%的有机相。氯化铵本身在pH2-3没有缓冲能力，最多算是调节离子强度。可以试试醋酸铵。

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9楼2017-06-24 13:36:30
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
爱嘉101: 金币+3, ★有帮助 2017-06-24 14:08:31
会不会是三氟乙酸浓度太高了，三氟乙酸一般浓度不要太高，损伤柱子，还有用完缓冲盐要及时冲柱子，不然在柱子上残留会造成堵塞啥的，对柱子损伤很大
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2楼2017-06-23 13:17:21
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by llw1986 at 2017-06-23 13:17:21
会不会是三氟乙酸浓度太高了，三氟乙酸一般浓度不要太高，损伤柱子，还有用完缓冲盐要及时冲柱子，不然在柱子上残留会造成堵塞啥的，对柱子损伤很大

不清楚呀，以前做过纯三氟醋酸调节pH到这个范围的，但是柱子正常的。做完之后没有用水冲，因为还要继续作样，一般是晚上下班的时候用水换下体系，清洗保存，时长不超过1.5h一般，是不是水洗不够？
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我不知道我想要什么，所以我一直在摸索
3楼2017-06-23 15:20:18
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱嘉101 at 2017-06-23 15:20:18
不清楚呀，以前做过纯三氟醋酸调节pH到这个范围的，但是柱子正常的。做完之后没有用水冲，因为还要继续作样，一般是晚上下班的时候用水换下体系，清洗保存，时长不超过1.5h一般，是不是水洗不够？...

恩 一般洗柱子是低流速高水相多冲一会，然后再梯度回到高有机相相保存柱子
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4楼2017-06-23 17:20:36
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