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爱嘉101

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助!!!!液相氯化铵缓冲液使用注意事项 已有2人参与

我采用500mL水溶解3.0g氯化铵,加三氟醋酸调pH至2.5-3.0做样,洗脱梯度在有机相50-95,柱效下降很快,为什么?是氯化铵体系使用的时候有什么限制吗?柱子是普通的C18反相柱
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我不知道我想要什么,所以我一直在摸索
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 9号77 at 2017-06-24 11:58:19
pH是不是太酸。

pH3左右,还在柱子正常范围呢
我不知道我想要什么,所以我一直在摸索
10楼2017-06-24 14:02:10
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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爱嘉101: 金币+3, 有帮助 2017-06-24 14:08:31
会不会是三氟乙酸浓度太高了,三氟乙酸一般浓度不要太高,损伤柱子,还有用完缓冲盐要及时冲柱子,不然在柱子上残留会造成堵塞啥的,对柱子损伤很大
2楼2017-06-23 13:17:21
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爱嘉101

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by llw1986 at 2017-06-23 13:17:21
会不会是三氟乙酸浓度太高了,三氟乙酸一般浓度不要太高,损伤柱子,还有用完缓冲盐要及时冲柱子,不然在柱子上残留会造成堵塞啥的,对柱子损伤很大

不清楚呀,以前做过纯三氟醋酸调节pH到这个范围的,但是柱子正常的。做完之后没有用水冲,因为还要继续作样,一般是晚上下班的时候用水换下体系,清洗保存,时长不超过1.5h一般,是不是水洗不够?
我不知道我想要什么,所以我一直在摸索
3楼2017-06-23 15:20:18
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱嘉101 at 2017-06-23 15:20:18
不清楚呀,以前做过纯三氟醋酸调节pH到这个范围的,但是柱子正常的。做完之后没有用水冲,因为还要继续作样,一般是晚上下班的时候用水换下体系,清洗保存,时长不超过1.5h一般,是不是水洗不够?...

恩 一般洗柱子是低流速高水相多冲一会,然后再梯度回到高有机相相保存柱子
4楼2017-06-23 17:20:36
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