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飞鱼~smart

新虫 (初入文坛)

[求助] [求助]如何判断反转之后的cDNA合格与否 分子生物 0 ... 已有2人参与

[求助]如何判断反转之后的cDNA合格与否
分子生物 0
飞鱼~smart
2017-06-20 18:03:35
楼主
初始金币 10
如题，判断反转之后cDNA合格与否，除了做荧光定量，可否通过核酸蛋白测定仪测定来判断cDNA合格与否？求大神指点！不胜感激！下面是我测定的一些样品浓度和曲线图！


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时间累积起来的是不容易被击溃的
1楼 2017-06-20 18:11:43
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回帖置顶 ( 共有1个 )

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
cDNA好坏，你要什么程度的好坏？简单的RT-PCR，接着做个PCR就完事了。
我不认同在ＲＴ之后可以通过ＯＤ对ｃＤＮＡ定量，这如何进行？ｃＤＮＡ要纯化么？体系里有ＲＮＡ（即便被ＲＮａｓｅＨ降解），有ＮＴＰ，这些都是强烈吸光的物质，然而ｃＤＮＡ又能占到多少比例？不知原理何在。
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5楼2017-06-21 13:39:51
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普通回帖

伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的这个帖子内容乱的不行。。。
一般RNA质量检测之后没问题的话，我们反转录完测一下浓度，然后稀释到200ng/ul左右。取1ul作为模板，用内参基因的引物进行PCR 看条带是否正确 明亮
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

飞鱼~smart
对也罢，错也罢；正也罢，逆也罢；通途也好，崎岖无妨……但问，吾心坚否？若坚，纵使歧路，以铁心，贯穿而过，亦为大道！不坚，便是坦途，也难登临绝顶，观险峰
2楼2017-06-20 22:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞鱼~smart

新虫 (初入文坛)
额，是挺乱的，可能也跟我在这块的理论知识薄弱有关，这块的基础理论背景资料哪里会有？想补一点是一点 @biostar2009

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时间累积起来的是不容易被击溃的
3楼2017-06-21 00:57:51
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飞鱼~smart

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-06-20 22:01:27
你的这个帖子内容乱的不行。。。
一般RNA质量检测之后没问题的话，我们反转录完测一下浓度，然后稀释到200ng/ul左右。取1ul作为模板，用内参基因的引物进行PCR 看条带是否正确 明亮

非常感谢！

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时间累积起来的是不容易被击溃的
4楼2017-06-21 00:58:10
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