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Rosyzx

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR失败 已有4人参与

用Fast DNA SPIN for Soil试剂盒提取了土壤总DNA ,稀释后进行pcr扩增,可是扩增总是失败,电泳后没有条带,不知大家有没有遇到这种情况,可不可以给我提点建议,谢谢大家

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stabilized

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你去分子那边交流可能好点
坚持!
2楼2017-06-19 17:33:24
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Rosyzx

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-06-19 17:33:24
你去分子那边交流可能好点

嗯呢,谢谢

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3楼2017-06-19 19:20:05
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的总DNA提取之后,电泳结果如何,首先要保证DNA没有问题,然后是PCR扩增,你的基因在这个总DNA里,是否存在,可以尝试做一个阳性对照实验,然后就是考虑PCR程序等问题

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4楼2017-06-19 23:00:09
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jingjing朱

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种情况我们在做小鼠的全基因组提取的时候遇到过,而且做了三次跑胶一直都是这个样子,老师说是基因组降解了,后来采取的解决措施是把原来的操作方法换掉了,改了两个点,一个是用试剂盒前处理成单细胞的方法,一个是试剂盒中间有一个操作,操作时间要求几个小时,我们给缩短了时间,然后就成功了。
如果是PCR时出现的问题,就帮不了你。

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5楼2017-06-20 06:32:37
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华中微生物

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
之前我也出现过这种情况,据有些文献说,这可能是因为有抑制pcr的物质存在,你可以试一试把稀释后的DNA放入4℃冰箱几天再做PCR,我们之前就是这样做的!

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6楼2017-06-23 16:44:49
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Rosyzx

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by Rosyzx at 2017-06-19 17:28:47
用Fast DNA SPIN for Soil试剂盒提取了土壤总DNA ,稀释后进行pcr扩增,可是扩增总是失败,电泳后没有条带,不知大家有没有遇到这种情况,可不可以给我提点建议,谢谢大家
...

嗯嗯,我试试,谢谢你

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7楼2017-06-23 21:00:27
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