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sqizeng金虫 (正式写手)
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caco-2细胞transwell问题 已有1人参与
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本人是化学出身，刚接触细胞实验，想在论坛里咨询各位大侠一些transwell的问题。 细胞密度：2*10的5次方，上室0.5ml，下室1.5ml 培养条件：DMEM，20%FBS，1%非必需氨基酸，1%ps 问题：1: 之前做过两次，在种板一个星期到10天后测电阻，只有120左右，这一次第三天，也是差不多这个电阻值，不知道为什么？下年两张图是三天后拍摄的transwell的细胞图 2: 每天换液的时候发现上室的培养基颜色会由红色变为浅黄色，下室变为浅红色，难道是细胞长得太快了吗？细胞培养的时候，复苏第二代的细胞1传4，第二天就基本长满了（80-90%）。 请各位多指导指导。   发自小木虫IOS客户端 |
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sqizeng
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2楼2017-06-19 20:18:41
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我前段时间也在做Cacao-2的Transwell模型，电阻120应该只能算是本底值了，细胞没有长成单层，或者因为你细胞生长过快，长满后出现空泡化了也会导致阻值上不去。我之前做的在12天左右阻值就达到1000Ω左右了。建议你可以优化一下细胞密度，还有血清是否降低一点更好？10%? pS: 我想请问一下你这个细胞的图是怎么拍的？你们用的那个公司的Transwell板？用倒置显微镜拍的吗？我之前尝试过，但是在镜下看不到，请问你是怎么看到的？ |
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3楼2017-06-21 09:17:32
sqizeng
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我也是觉得细胞长得太快了，本来这个细胞按理来说是比较慢的，我之前也用过2万个细胞去铺板，但是也没有成功，不知道你当时铺板没孔细胞数是多少？按理说长得快不是更容易分泌紧密连接吗？你用的也是10%的FBS吗？ ps:照片我是直接在显微镜下用手机拍的。 发自小木虫IOS客户端 |
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