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sophiasjz

新虫 (初入文坛)

[求助] 不同酶切位点的pcr产物与表达载体能否连接成功

前几天做了连接转化,pcr产物与pMD18T连接后用BamHI和HIndlll双酶切回收的目的条带,而pET28a是用ecor I和sal I双酶切回收的目的条带,将2种产物进行了连接转化,菌落pcr结果鉴定阳性,但是双酶切验证没有目的条带,且切出了2000bp以上的3条带。
  正常来说,酶切位点不一样,怎么可能连接上呢,但是pcr确实阳性,什么原因
不同酶切位点的pcr产物与表达载体能否连接成功

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balalalabala

新虫 (小有名气)

粘性末端一样就能连上
2楼2017-06-08 12:35:45
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

不理解你做这个实验的目的。还有你的pcr阳性是什么意思?用的primer 是什么?

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3楼2017-06-08 14:15:37
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