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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取弥散是什么问题
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宋豪礼

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA提取弥散是什么问题 已有7人参与

图1的RNA为什么会弥散？是否可以用来做RT-PCR


图2最下面那一条带太亮了，会不会影响RT-PCR


为什么会出现上面这两种情况，有什么好的方法可以避免？

RNA提取弥散是什么问题
图片1.png


RNA提取弥散是什么问题-1
图片2.png
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1楼 2017-06-05 15:47:15
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bbass533

禁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-06 07:48:57
本帖内容被屏蔽
2楼2017-06-05 15:59:53
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sherlock0088

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-06 07:49:08
降解了，建议带手套口罩，全程用RNasefree的枪头和离心管，低温4度离心，试剂专用，溶解的水用DEPC水，电泳槽使用前清洗，然后换新电泳液(最好用depc水配)。我现在能想到的就这些。

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3楼2017-06-05 20:57:36
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sherlock0088

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sherlock0088 at 2017-06-05 20:57:36
降解了，建议带手套口罩，全程用RNasefree的枪头和离心管，低温4度离心，试剂专用，溶解的水用DEPC水，电泳槽使用前清洗，然后换新电泳液(最好用depc水配)。我现在能想到的就这些。
...

建议用200v左右的电压跑胶

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4楼2017-06-05 20:58:40
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飞鱼~smart

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
marker都跑成那样了，电泳参数是不是要变下，

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时间累积起来的是不容易被击溃的
5楼2017-06-05 22:04:37
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紫风舞鸢

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
大部分是降解了，普通pcr可以做，但是做qpcr的话质量不太好了。
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云中漫步
6楼2017-06-07 09:53:28
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手心手背ing

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
RNA 提取过程中要保证低温   佩戴口罩手套   减少降解  电泳缓冲液每次都要换新鲜的  从图来看很多RNA 都降解为 5s了   做qpcr结果不可靠

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7楼2017-10-12 15:35:43
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酷莱博

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
下面小片段越亮，降解越严重

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8楼2017-10-13 13:08:33
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WLKG_HQ

新虫 (小有名气)
跑胶的事

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9楼2018-01-07 23:27:53
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