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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 水产 » 求助关于藻类MDA丙二醛的测定问题
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faybai1114

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于藻类MDA丙二醛的测定问题 已有2人参与

如题，本人用农药对淡水微藻进行急性毒性暴露试验，测定了抗氧化酶系统及丙二醛，结果显示处理组的MDA与对照组相比无显著差异，ps：处理组的生长状况较差， 文献上的结果基本都显示随着处理浓度的升高，MDA的值也会升高，求助各位大神，不知道是什么原因呢？所用方法为：
（1）酶液的提取：
①　收集40ml藻液，4℃ 7000r离心10min；
②　将藻细胞转移至研钵中，0-4℃（加液氮）条件下研磨至匀浆。加4℃PBS缓冲液定容至4m；
(PBS缓冲液配置：甲液-0.05mol/L Na2HPO4溶液：磷酸氢二钠 7.099g,定容至1000ml,于棕色瓶中储存；乙液-0.05mol/L KH2PO4:称取磷酸二氢钾6.803g,定容至1000ml.取用pH为 7.8，其中甲液90ml,乙液10ml)
③　4℃，7000r，15min 离心，上清为粗酶液。
（2）丙二醛（MAD）测定   硫代巴比妥酸法测定
试剂:50 mol/L、PH7.8的PBS
     20%三氯乙酸（TCA）：10g溶于50ml的蒸馏水中，根据用量来确定所需
     0.5%硫代巴比妥酸（TBA）溶液：0.5gTBA溶解于100ml 20%TCA中
步骤：
(1)总体系共4ml，首先向10ml的比色管中加入0.5ml的PBS，接着加入2.5ml0.5%的TBA溶液，最后加入1ml的酶液。
(2)沸水浴100℃、20min
(3)分别测定450nm、532nm及600nm的光吸收值
2、计算方式：MDA（mmol/L）=6.45*(OD532-OD600)-0.56*OD450
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1楼 2017-06-02 16:30:11
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qiafffff

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问配制10%TCA时，TCA不溶解，溶液成浑浊状态，该如何解决?
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5楼2023-05-27 11:01:45
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凌晨的雾霾

铜虫 (小有名气)
这个方法是哪里找的？
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2楼2019-03-28 15:35:51
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wzwei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

微藻应该反复冻融加上超声波处理才能析出酶，这样才能反映真实的酶活
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3楼2019-05-13 16:23:45
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DINGRUNRUN

铁虫 (小有名气)
你这个计算得到的是浓度吧，不是MDA含量
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4楼2020-05-28 15:32:28
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