24小时热门版块排行榜    

查看: 2791  |  回复: 4

faybai1114

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于藻类MDA丙二醛的测定问题 已有2人参与

如题,本人用农药对淡水微藻进行急性毒性暴露试验,测定了抗氧化酶系统及丙二醛,结果显示处理组的MDA与对照组相比无显著差异,ps:处理组的生长状况较差, 文献上的结果基本都显示随着处理浓度的升高,MDA的值也会升高,求助各位大神,不知道是什么原因呢?所用方法为:
(1)酶液的提取:
① 收集40ml藻液,4℃ 7000r离心10min;
② 将藻细胞转移至研钵中,0-4℃(加液氮)条件下研磨至匀浆。加4℃PBS缓冲液定容至4m;
(PBS缓冲液配置:甲液-0.05mol/L Na2HPO4溶液:磷酸氢二钠 7.099g,定容至1000ml,于棕色瓶中储存;乙液-0.05mol/L KH2PO4:称取磷酸二氢钾6.803g,定容至1000ml.取用pH为 7.8,其中甲液90ml,乙液10ml)
③ 4℃,7000r,15min 离心,上清为粗酶液。
(2)丙二醛(MAD)测定   硫代巴比妥酸法测定
试剂:50 mol/L、PH7.8的PBS
     20%三氯乙酸(TCA):10g溶于50ml的蒸馏水中,根据用量来确定所需
     0.5%硫代巴比妥酸(TBA)溶液:0.5gTBA溶解于100ml 20%TCA中
步骤:
(1)总体系共4ml,首先向10ml的比色管中加入0.5ml的PBS,接着加入2.5ml0.5%的TBA溶液,最后加入1ml的酶液。
(2)沸水浴100℃、20min
(3)分别测定450nm、532nm及600nm的光吸收值
2、计算方式:MDA(mmol/L)=6.45*(OD532-OD600)-0.56*OD450
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌晨的雾霾

铜虫 (小有名气)

这个方法是哪里找的?
2楼2019-03-28 15:35:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzwei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

微藻应该反复冻融加上超声波处理才能析出酶,这样才能反映真实的酶活
3楼2019-05-13 16:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DINGRUNRUN

铁虫 (小有名气)

你这个计算得到的是浓度吧,不是MDA含量
4楼2020-05-28 15:32:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiafffff

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问配制10%TCA时,TCA不溶解,溶液成浑浊状态,该如何解决?
5楼2023-05-27 11:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 faybai1114 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +8 医学老男孩 2026-08-13 16/800 2026-08-13 19:18 by 医学老男孩
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见