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lannihan

新虫 (小有名气)

[求助] 关于D101大孔吸附树脂洗脱问题?已有3人参与

现在在过大孔吸附树脂柱,已经过了三天了,上了30克的样品,用水洗脱,已经洗脱了七升的水溶液出来了,可是还是有颜色,水太难蒸干了,想请问下做过的前辈,你们过柱洗脱的时候有用这么多洗脱液?而且样品一直是在柱口,然后师兄说是因为我上样的时候流速开的太小了,所以样品酒一直在柱口不下去,我个人是觉得是因为样品不溶于水,所以用水洗脱不下去,然后样品酒还在柱口,不知道各位虫友们是否有这样的情况,我是学生物的,没做过药化实验,理论知识也不足,求指导
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理想00705

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

D101一般上样后用水冲几个柱体积,将未吸附的样品冲洗下来,然后用不同比例的乙醇冲几个柱体积,将样品洗脱下来,至于多少比例的乙醇需要提前小试摸个条件,上样时需要低流速,确保样品吸附充分,醇洗脱时可以不用限制流速。一般不会用水当洗脱剂洗脱,要选择与你所需样品溶解性好的有机溶剂,如乙醇、甲醇等。
努力奋斗
10楼2017-05-28 13:14:15
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普通回帖

江月夜雨寒

新虫 (小有名气)

2楼2017-05-24 20:18:39
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方遒豪洒

新虫 (正式写手)

你样品的溶解性知道么?如果本身在水中不溶,你用多少水冲都下不来啊

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3楼2017-05-25 10:28:50
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方遒豪洒

新虫 (正式写手)

而且D101,一般也不一上来就用水冲吧

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4楼2017-05-25 10:29:35
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)

大孔树脂一般是用水先顶洗杂质,然后用有机溶剂洗脱,首选甲醇和丙酮,还有你的样品是那一类?

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5楼2017-05-25 15:16:52
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woshizxiaof

木虫 (正式写手)

一般水洗下来的都是杂质,甚至可以不要,然后梯度洗吧,30%乙醇,甲醇也行,还是看你要的东西来

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未来在前行~~~
6楼2017-05-25 16:57:47
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cranenn

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
虽然不知道你的具体情况。但是我们实验室做的时候,一般用的是0.1·v/v%的tfa水溶液
7楼2017-05-26 16:08:54
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myp334012

新虫 (初入文坛)

刚冲过,一直有颜色是因为样品水溶性差,建议醇水梯度洗,应该能下来

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all is well
8楼2017-05-27 10:21:15
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nothingU

新虫 (正式写手)

上样的时候流速小不是更好 吸附率更高 有颜色可能是色素嘛 你应该事先先过小柱摸下条件

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9楼2017-05-27 22:51:07
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