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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 关于D101大孔吸附树脂洗脱问题？
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lannihan

新虫 (小有名气)

[求助] 关于D101大孔吸附树脂洗脱问题？已有3人参与

现在在过大孔吸附树脂柱，已经过了三天了，上了30克的样品，用水洗脱，已经洗脱了七升的水溶液出来了，可是还是有颜色，水太难蒸干了，想请问下做过的前辈，你们过柱洗脱的时候有用这么多洗脱液？而且样品一直是在柱口，然后师兄说是因为我上样的时候流速开的太小了，所以样品酒一直在柱口不下去，我个人是觉得是因为样品不溶于水，所以用水洗脱不下去，然后样品酒还在柱口，不知道各位虫友们是否有这样的情况，我是学生物的，没做过药化实验，理论知识也不足，求指导
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1楼2017-05-24 16:44:21
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lannihan

新虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by 理想00705 at 2017-05-28 13:14:15
D101一般上样后用水冲几个柱体积，将未吸附的样品冲洗下来，然后用不同比例的乙醇冲几个柱体积，将样品洗脱下来，至于多少比例的乙醇需要提前小试摸个条件，上样时需要低流速，确保样品吸附充分，醇洗脱时可以不用限 ...

谢谢，我现在是先用水洗脱，等到洗得没颜色之后再用有机溶剂洗脱的，可是水洗脱一直有颜色
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11楼2017-05-31 14:39:24
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lannihan

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9楼: Originally posted by nothingU at 2017-05-27 22:51:07
上样的时候流速小不是更好 吸附率更高 有颜色可能是色素嘛 你应该事先先过小柱摸下条件

没有做预实验，直接上大柱了，这个流程太久，如果再慢慢摸条件就要比不了业了，现在的做法跟师兄做的差不多，是因为师兄没做出正结果，老板又坚信有，所以才做的
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12楼2017-05-31 14:41:44
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lannihan

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by myp334012 at 2017-05-27 10:21:15
刚冲过，一直有颜色是因为样品水溶性差，建议醇水梯度洗，应该能下来

样品是水相里的东西，能够溶于水的，现在是先用水洗，后边会用有机溶剂洗脱的，只是现在水洗太久了，想问下这种情况是不是正常的？
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13楼2017-05-31 14:43:32
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lannihan

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7楼: Originally posted by cranenn at 2017-05-26 16:08:54
虽然不知道你的具体情况。但是我们实验室做的时候，一般用的是0.1·v/v%的tfa水溶液

好的，谢谢
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14楼2017-05-31 14:43:47
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lannihan

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6楼: Originally posted by woshizxiaof at 2017-05-25 16:57:47
一般水洗下来的都是杂质，甚至可以不要，然后梯度洗吧，30%乙醇，甲醇也行，还是看你要的东西来

谢谢，不过我是做非靶标的，用的是水相过柱子，所以水洗出来的要进行检测才知道是不是有药理作用的
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15楼2017-05-31 14:45:32
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lannihan

新虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-05-25 15:16:52
大孔树脂一般是用水先顶洗杂质，然后用有机溶剂洗脱，首选甲醇和丙酮，还有你的样品是那一类？

样品是水相，本身溶于水的，水洗好久了还一直有颜色，感觉不太正常，因为水洗出来的要旋蒸很久，太慢了，所以想问问前辈们洗脱了多久
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16楼2017-05-31 14:47:34
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lannihan

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 方遒豪洒 at 2017-05-25 10:29:35
而且D101，一般也不一上来就用水冲吧

看很多文献是这样的，一开始会用水洗
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17楼2017-05-31 14:48:04
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lannihan

新虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 方遒豪洒 at 2017-05-25 10:28:50
你样品的溶解性知道么？如果本身在水中不溶，你用多少水冲都下不来啊

样品是溶于水的，现在水洗就一直有淡淡的黄色，已经洗脱了好多了
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18楼2017-05-31 14:48:57
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