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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我用的是零背景克隆载体，但是菌液pcr总是扩不出条带来、我能否将菌液送测序试试呀
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angus

新虫 (初入文坛)

[交流] 我用的是零背景克隆载体，但是菌液pcr总是扩不出条带来、我能否将菌液送测序试试呀

希望大家能帮我想想办法

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bbass533

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1楼 2017-05-21 21:21:49
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cqqxmc

新虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-22 20:05:05
可以送测序，不过还是构建失败的可能性比较大，不知道你连接转化做过几次了
不太清楚你说的零背景克隆载体是什么意思
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2楼2017-05-22 08:51:06
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bbass533

禁虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-22 20:05:21
本帖内容被屏蔽
3楼2017-05-22 16:23:10
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木虫 (著名写手)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-22 20:05:35
如果确定是零背景，至少背景质粒比较少，转化出来的菌落可以直接刮下来提取质粒，电泳看看目的位置是否有DNA，然后胶回收DNA进行PCR，提取到的质粒，即使含量很低，也可以再拿去转化。
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为什么
4楼2017-05-22 18:59:33
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