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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于酵母单杂交的疑惑
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 关于酵母单杂交的疑惑 已有2人参与

我看到了一个clontech 的酵母单杂交说明书，用的是pAbAi的载体，但是这个载体需要单酶切才能整合酵母基因组中，要是自己的目的启动子也有酶切位点的话，不就把载体切断了吗？这该怎么办？要用别的系统吗？求高人解答。

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1楼 2017-05-18 23:59:23
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请叫我张有理

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

想问下单杂构建载体的时候有一个目的片段的载体，有一个突变的载体做对照，请问这个突变的序列怎么得到的？有没有什么特定的方法？还是就随便变，只要跟目的序列不一致即可？求解答，大神们
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5楼2017-08-11 23:39:52
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小猪猪123456

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
lwk5716: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-05-31 23:41:07
你自己的顺式作用元件上面也BstbI这个酶切位点吗？这样的话好像确实是不能用了，但是如果是构建的顺式作用元件的话，不是应该是32-3个重复序列吗？怎么会有这个酶切位点的识别位点呢？
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2楼2017-05-31 10:06:43
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小猪猪123456 at 2017-05-31 10:06:43
你自己的顺式作用元件上面也BstbI这个酶切位点吗？这样的话好像确实是不能用了，但是如果是构建的顺式作用元件的话，不是应该是32-3个重复序列吗？怎么会有这个酶切位点的识别位点呢？

我看我的师兄师姐会先截比较长的一段，来看有没有和目的基因结合，截的长，所以有时候会有酶切位点。

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3楼2017-05-31 23:40:53
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pjxiongjing

新虫 (小有名气)
你是做单杂筛库么

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4楼2017-07-23 18:00:04
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