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lwk5716

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[求助] 关于酵母单杂交的疑惑已有2人参与

我看到了一个clontech 的酵母单杂交说明书，用的是pAbAi的载体，但是这个载体需要单酶切才能整合酵母基因组中，要是自己的目的启动子也有酶切位点的话，不就把载体切断了吗？这该怎么办？要用别的系统吗？求高人解答。

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1楼 2017-05-18 23:59:23

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小猪猪123456

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【答案】应助回帖

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lwk5716: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-05-31 23:41:07

你自己的顺式作用元件上面也BstbI这个酶切位点吗？这样的话好像确实是不能用了，但是如果是构建的顺式作用元件的话，不是应该是32-3个重复序列吗？怎么会有这个酶切位点的识别位点呢？

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2楼2017-05-31 10:06:43

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lwk5716

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2楼: Originally posted by 小猪猪123456 at 2017-05-31 10:06:43
你自己的顺式作用元件上面也BstbI这个酶切位点吗？这样的话好像确实是不能用了，但是如果是构建的顺式作用元件的话，不是应该是32-3个重复序列吗？怎么会有这个酶切位点的识别位点呢？

我看我的师兄师姐会先截比较长的一段，来看有没有和目的基因结合，截的长，所以有时候会有酶切位点。

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3楼2017-05-31 23:40:53

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