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zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

[交流] 纯化人充电交流 已有8人参与

各位虫友们,如果你点开了这个帖子,说明你是一位纯化人;
我做生物下游技术5、6年了,目前感觉自己有许多知识需要学习,特开此贴与各位同行人交流学习;
抗体纯化、蛋白纯化、多肽纯化、氨基酸纯化等等,欢迎互相交流、互相提高;有问题可以提问题,有好经验的欢迎分享。
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纯化
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zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 幽阶一夜苔生 at 2017-05-19 09:47:59
你们都是纯化的分子蛋白之类的,试问虫友们有没有做过颗粒纯化的,比如说细菌芽孢,本人正在做这方面的工艺研究,问题不老少,有同方向的可以一起讨论下。。。。。

还真没做过这方面的研究,搬个凳子学习学习
纯化
13楼2017-06-05 16:33:46
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普通回帖

zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

纯化
2楼2017-05-16 15:19:46
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jxqwj

金虫 (著名写手)

啥也没有啊
3楼2017-05-16 15:28:27
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zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jxqwj at 2017-05-16 15:28:27
啥也没有啊

此贴是交流贴哦,有问题可以提问题,有经验欢迎分享哦
纯化
4楼2017-05-16 15:46:17
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zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

纯化
5楼2017-05-17 08:35:23
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光明小嘿嘿

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白质纯化后再浓缩出现沉淀怎么办??

发自小木虫Android客户端
6楼2017-05-18 11:41:06
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liaohongjun

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
针对只有ng级的蛋白?你们纯化思路是什么?

发自小木虫Android客户端
7楼2017-05-18 15:51:22
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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你们都是纯化的分子蛋白之类的,试问虫友们有没有做过颗粒纯化的,比如说细菌芽孢,本人正在做这方面的工艺研究,问题不老少,有同方向的可以一起讨论下。。。。。
8楼2017-05-19 09:47:59
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duowan17

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
大家好:
       有一大肠杆菌重组的蛋白,等电点5.0左右。用阴离子交换(DEAE、QFF)目的蛋白均流穿,PB或Tris缓冲液均如此,尝试过改变PH值及缓冲液浓度,效果不大,且流穿峰中杂蛋白也比较多。尝试疏水层析,20%硫酸铵目的蛋白大部分位于上清,30%硫酸铵目的蛋白几乎全部沉淀,但是沉淀蛋白为不可溶状态(缓冲液为PB,用Tris缓冲液溶出蛋白相对较多一些),在20%硫酸铵条件下,目的蛋白不挂柱,依旧流穿。等电点沉淀(PH5.0),蛋白沉淀后复溶不可溶。乙醇沉淀-20%乙醇沉淀蛋白复溶不溶。有没有经验丰富的大神指点迷津,跪谢!
9楼2017-05-26 15:04:00
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zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 光明小嘿嘿 at 2017-05-18 11:41:06
蛋白质纯化后再浓缩出现沉淀怎么办??

一般情况下出现这种情况需要考虑尝试更换溶液体系,同时研究pH的影响,同时需要研究一下这种沉淀是否是可逆的,如果是不可逆的就要提前控制浓缩的浓度,避免这种现象出现
纯化
10楼2017-06-05 16:23:05
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