24小时热门版块排行榜    

查看: 2230  |  回复: 16

zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by liaohongjun at 2017-05-18 15:51:22
针对只有ng级的蛋白?你们纯化思路是什么?

ng级的难度不在纯化,而在检测对样品的需求量
纯化
11楼2017-06-05 16:24:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by duowan17 at 2017-05-26 15:04:00
大家好:
       有一大肠杆菌重组的蛋白,等电点5.0左右。用阴离子交换(DEAE、QFF)目的蛋白均流穿,PB或Tris缓冲液均如此,尝试过改变PH值及缓冲液浓度,效果不大,且流穿峰中杂蛋白也比较多。尝试疏水层析,20 ...

等单点只是一种表征参数,高于等电点可能带阴离子,但是这种阴离子对于层析是否是有效的阴离子与蛋白的空间结构也是密切相关的,所以高于等电点不一定就会带有效的层析负电荷,所以可以尝试一下阳离子,加入尿素等手段试试,纯化就是要多试试;如果流穿出的杂蛋白是目的蛋白的结构类似物,那么你的实验没问题,如果杂蛋白结构与你的目的蛋白结构差别比较大的话,就要审视一下你的实验是否有问题,比如树脂的处理是否有问题;
你可以尝试一下亲和层析,比如染料亲和层析;
关于沉淀,需要了解你的蛋白的性质才好分析;
纯化
12楼2017-06-05 16:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zstzhfnuli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 幽阶一夜苔生 at 2017-05-19 09:47:59
你们都是纯化的分子蛋白之类的,试问虫友们有没有做过颗粒纯化的,比如说细菌芽孢,本人正在做这方面的工艺研究,问题不老少,有同方向的可以一起讨论下。。。。。

还真没做过这方面的研究,搬个凳子学习学习
纯化
13楼2017-06-05 16:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liaohongjun

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by zstzhfnuli at 2017-06-05 16:24:19
ng级的难度不在纯化,而在检测对样品的需求量...

有道理,目前我有个项目,目标蛋白含量极低!没有一直找不到准确有效的含量测定方法,同时其他杂蛋白也会影响检测!

发自小木虫Android客户端
14楼2017-06-07 11:15:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18328239332

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的甘氨酸中含有15%左右的谷氨酰胺,这种情况有没有办法分离纯化出甘氨酸呢
15楼2018-03-16 09:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

my900521

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有木有做过蛋白稳定性分析的小伙伴,或者是buffer条件筛选

发自小木虫IOS客户端
16楼2018-03-16 11:34:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytp123

新虫 (小有名气)

17楼2018-03-20 22:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zstzhfnuli 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +5 某某某某位 2026-03-21 5/250 2026-03-23 23:36 by 热情沙漠
[考研] 材料专硕找调剂 +3 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:13 by peike
[考研] 材料专业求调剂 +11 hanamiko 2026-03-18 11/550 2026-03-23 23:12 by peike
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +4 谷雨上岸 2026-03-23 5/250 2026-03-23 21:18 by 不惑可乐
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
信息提示
请填处理意见